"COLO 320DM Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞可產(chǎn)生5-羥色胺、去甲、、ACTH和甲狀旁腺素。角蛋白、波形蛋白弱陽(yáng)性。培養(yǎng)條件: RPMI 1640 10%FBS
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
COLO 320DM Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COLO 320DM Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮+貼壁
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴細(xì)胞
HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
MOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細(xì)胞、GM3570細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
GM06141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-I細(xì)胞、THP 1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞
H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞
FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞
Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
HTR8svn細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9204細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞、HT-144細(xì)胞
Hos TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS1細(xì)胞、H650細(xì)胞、ACC3細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
High5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2BBe 1細(xì)胞、Kit225 K6細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 299細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、C2C12細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、MX1細(xì)胞
CL 1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT-8810細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞、NCI-H292細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
KNS42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
COLO 320DM Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞
HEK293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343-MG細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞、Murine Carcinoma-38細(xì)胞
RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞
GTL16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細(xì)胞、H-1341細(xì)胞、MBVP細(xì)胞
DLM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFH細(xì)胞、U-343細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞
CO115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.5細(xì)胞、PECAPJ34細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
K562/ADP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞
MLMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H727細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞、SW1417細(xì)胞
HOS(TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAVSMC細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞
Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞
H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
FHC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HELA-GFP細(xì)胞、T-24細(xì)胞、S91細(xì)胞
Hs578Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10 RGB細(xì)胞、A427細(xì)胞、EFM192C細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
NCI-H441-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1975細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞、Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞
3T3-Swiss細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 24細(xì)胞、LIPF155C細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
RD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 675.T細(xì)胞、MDA453細(xì)胞、MES-13細(xì)胞
NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
130 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2106細(xì)胞、3396細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
SK-MEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283MED細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
HEK-293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:201T細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞、STO細(xì)胞
Calu 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-1-Lu細(xì)胞、SW780細(xì)胞、RT4-D6-P2T細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
Reuber H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細(xì)胞、M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、JM細(xì)胞
HEI193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞
HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞
COLO 320DM Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNE3細(xì)胞、LK-2細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
BC-009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7細(xì)胞、L-540細(xì)胞、Pt-K1細(xì)胞
D 407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 15細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞、ECC12細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
Hs 688(A).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC25細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
Calu-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-378細(xì)胞、OP-9細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞
GI-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細(xì)胞、SW-1088細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞
"