"Eca-109 Thawing人食管癌細胞系
細胞背景資料：１９７３年建系，來自人食管中段鱗癌組織，小塊法原代培養(yǎng)建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
Eca-109 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長：貼壁
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Eca-109 Thawing人食管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒炐枰?，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應(yīng)后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
Co 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細胞、JHH7細胞、NCIH1688細胞
Ramos 2G6 4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-04-03細胞、TE-85細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
H-2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
SW-1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2342細胞、NB19-RIKEN細胞、SKNEP細胞
OPM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞
MT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAC細胞、PANC0813細胞、BBE細胞
KYSE 510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
COLO-357細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU449細胞、S91細胞、MM1.S細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
H-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細胞、H1155細胞、HuT 102細胞
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
HB 611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #1846細胞、CAL12T細胞、H2405細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、3AA細胞、COR-L51細胞
SHG44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293S細胞、CFSC-2G細胞、Douglas Foster-1細胞
U118細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-2細胞、GM17346細胞、MRAEC細胞
H-676細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag 8.6.5.3細胞、Hs742T細胞、H1238細胞
Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
OCI-Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
MDA MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y-R細胞、MX1細胞、E.G7-OVA細胞
HEK-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞
PC-3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細胞、M059J細胞、CCK-81細胞
Sp2/O-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細胞、SJ-RH30細胞、H-87細胞
Eca-109 Thawing人食管癌細胞系
HHL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞
P3/ag細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A673細胞、MOLM13細胞、Lewis Lung細胞
HuT 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞
Hs-940細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞
ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
FRH-0201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
2BS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC1 Clone 6細胞、NCI-H2030細胞、H69細胞
MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
J82 COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞
Neuro2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DKMG細胞、IPAM-WT細胞、H-1651細胞
LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細胞、SY5Y細胞、NCIH1734細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
NCIH1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
SW48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
CHOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
A-431細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細胞、Raji細胞、SKBR-3細胞
HT 1197.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
Line 207細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
CCLP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
Eca-109 Thawing人食管癌細胞系
J82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細胞、HT-22細胞、293FT細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
HFL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
GC1-SPG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
SF-767細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細胞、IOSE-Mar細胞、CT 26細胞
"