"Eca-109 epithelioid cells人食管癌細胞系 細胞背景資料:1973年建系,來自人食管中段鱗癌組織,小塊法原代培養(yǎng)建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞 NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞 MM.1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞 細胞生長:貼壁 Eca-109 epithelioid cells人食管癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞 HCC44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞 SUP-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞 RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞 OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Eca-109 epithelioid cells人食管癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞 PLC PRF 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RLE-6TN細胞、U-2932細胞、DMS-53細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞 PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HRI細胞、SNU-878細胞、HOP 62細胞 SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞 ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞 RK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細胞、EJ1細胞、HTR-8/SVneo細胞 GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞 BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞 Eca-109 epithelioid cells人食管癌細胞系 3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞 MSTO-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞 HEC1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2029細胞、GES1細胞、Bac12F5細胞 QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞 U-251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-962細胞、RPTEC TERT1細胞、Hs840T細胞 HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞 Panc10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞 B 95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞 HEK/293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5A細胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、L-M[TK-]細胞 KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞 SK_HEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 S細胞、Panc 03.27細胞、Hk-2細胞 TJ905細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞 CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞 JiyoyeP-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞 MLFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞 3T3-A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞 XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞 3T3(A31)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細胞、H-548細胞、PL-11細胞 MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞 OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞 GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞 WTRL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞 PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞 NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞 hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞 U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞 WSUDLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞 X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞 CCD1112Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1RGB細胞、BL6細胞、MV-4:11細胞 A375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞 EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞 RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞 HM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞 NCCIT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細胞、Ca Ski細胞、NPC-TW01細胞 P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞 OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞 YES2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175細胞、WM2664細胞、H-295R細胞 TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞 APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞 NCI-H676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞 HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞 SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞 SBC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞 MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞 NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞 TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞 HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞 C3H/10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT-1細胞、SF763細胞、RTMC細胞 NCI-H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞 CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞 GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞 Eca-109 epithelioid cells人食管癌細胞系 NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞 H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676B細胞、JeKo 1細胞、HT 1080.T細胞 BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、NIH:OVCAR4細胞、HRGEC細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細胞、SU-86-86細胞、SKGIIIA細胞 "
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