"D407 Thawing人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
D407 Thawing人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
細胞生長：貼壁
如何進行細胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復(fù)蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
D407 Thawing人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
HUVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
GP5d細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞
Panc 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47-D細胞、Hs675T細胞、Pan02細胞
C666-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
NPA87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細胞、Sc-1細胞、SHEP1細胞
C666-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM細胞、WI-38細胞、AU-Mel細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-6細胞、H841細胞、HCV-29細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
NK-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WPMY1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞、SU-DHL-4細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NU-GC-2細胞、SUDHL6細胞
GI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-10細胞、SW-1088細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞
NF639細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞
CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
MC9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞
TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞
HCC 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC1469細胞、Ku812細胞、NCI-H2171細胞
CHO-Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞
JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞
NOZC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442A細胞、MFE-280細胞、Hs 636.T細胞
D407 Thawing人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
Hs-600-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞
HCC0202細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-CPAP細胞、HT-29/CX-1細胞、OV-1063細胞
A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
SK-Mel1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
SKO007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L1210細胞、BL-6細胞、HNE-3細胞
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
Potorous tridactylus Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2BBe細胞、Eca-109細胞、H157細胞
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
PK-136細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞
CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
no-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細胞、KMB-17細胞、HRIF細胞
HeLa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc2_03細胞、SK-N-SH細胞、PC-9S1細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
LC1/Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞
LNCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y79細胞、CCK81細胞、PE/CA-PJ34細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
NCI-H774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
HPF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細胞、SVHUC細胞、Hepatoma-22細胞
H-358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細胞、H-2126細胞、MG-63細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞
SMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404A細胞、FRTL5細胞、Caki-2細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
D407 Thawing人視網(wǎng)膜色素上皮細胞系
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞
HeLa S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H82細胞、H676B細胞、Mink細胞
P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞
H-1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCO細胞、CHP 212細胞、MCFs細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
MZCRC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
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