"TE-9 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
TE-9 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內(nèi)可長滿。
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
TE-9 Thawing人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長：二、細(xì)胞細(xì)化太過，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
RAMOS2G64C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy細(xì)胞、MADB106細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞
Tb1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-774細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞、BE(2)C細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
U-343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細(xì)胞、H735細(xì)胞、H1385細(xì)胞
HMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H226細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞、H4細(xì)胞
SKO007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L1210細(xì)胞、BL-6細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞
E.G7-OVA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞、AD-293細(xì)胞
SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞
GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞
Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4I細(xì)胞、M109細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞
SGC7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97-H細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
Case 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2106細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、H1666細(xì)胞
SUDHL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly19細(xì)胞、N1E115細(xì)胞、GM05887細(xì)胞
NCIH1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC5細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞、HRA19細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
MCF-7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-Ca.256細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞、EJ 138細(xì)胞
NUGC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞、H1703細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
TE-9 Thawing人食管癌細(xì)胞系
U138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN-6細(xì)胞、ST-2細(xì)胞、BIU87細(xì)胞
SK-RC 52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO11細(xì)胞、McCoy細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞
LMH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
PC-9/S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86-86細(xì)胞、H-498細(xì)胞、D407細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
P560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細(xì)胞、H889細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞
H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 F1細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞、TE-671細(xì)胞
CMT-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細(xì)胞、tdott細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞
H-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2 (E6/E7)細(xì)胞、E304細(xì)胞、NCI-H1048細(xì)胞
CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞
GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞
UPCISCC154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細(xì)胞、SK-N-BE(1)n細(xì)胞、138 MG細(xì)胞
95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞
A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
Dunn LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：343MG細(xì)胞、Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞
COLO 680N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG(P12)細(xì)胞、J45.01細(xì)胞、5637細(xì)胞
EB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
HMy2.CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞、MC-38細(xì)胞
293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細(xì)胞、SUM159細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞
BL1339細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細(xì)胞、OVISE細(xì)胞、H-358細(xì)胞
SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞
NBL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no. 8226細(xì)胞、PL-12細(xì)胞、32D clone 3細(xì)胞
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85 ClF-5細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞
KPL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1417細(xì)胞、SW626細(xì)胞、BMDC細(xì)胞
LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞
TE-9 Thawing人食管癌細(xì)胞系
U-251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞
BSC40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 82細(xì)胞、HCC-1599細(xì)胞、751-NA細(xì)胞
KYSE 140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU19-19細(xì)胞、SG231細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞
GH 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞
H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細(xì)胞、SPCA-1細(xì)胞、MA-c細(xì)胞
PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞
HCC1187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARIP細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞、MM6細(xì)胞
MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞
MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞
Swiss3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞
NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞
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