"SNU-484 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
SNU-484 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SNU-484 Thawing人胃癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明：成纖維細(xì)胞：來(lái)自胎兒傳代５０次后衰老死亡，來(lái)自成人傳代２０次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān)；來(lái)自小鼠傳代１４--２８次后衰老死亡，來(lái)自烏龜傳代９０--１２５次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化，包括：蛋白質(zhì)合成速度降低，已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí)，細(xì)胞核，線粒體，膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因，尚無(wú)定論，出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō)，其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?，F(xiàn)象，常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有３種：壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中，因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵，導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去，稱為細(xì)胞的病理死亡，或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡；細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件，不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理，如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況，一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分；似乎帶有“犧牲局部，保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡，明顯地受遺傳控制，稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡，是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程，無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō)，都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用，在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象，凋亡失控的結(jié)果將是可怕的：凋亡不足時(shí)，易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病，如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
BNL-CL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW-MEL-38細(xì)胞、HSF細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞
Anip-973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D 407細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞、RKOE6細(xì)胞
BT549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-A細(xì)胞、U343MG細(xì)胞、DMS79細(xì)胞
MPC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-886細(xì)胞、NCIH1703細(xì)胞、MOLM-14細(xì)胞
SNU387細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3L1細(xì)胞、SNU739細(xì)胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞
aNK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA8細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、NALM-6-M1細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞
IR 983F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細(xì)胞、Detroit-562細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞
NCI-H220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細(xì)胞、WM 239細(xì)胞、MUTZ1細(xì)胞
SK-MEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO cell clone K1細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞
H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 125細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、MES 23.5細(xì)胞
MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-A31細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、SN12PM6細(xì)胞
C518細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
PLB985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞、Panc-05.04細(xì)胞
YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
PC-3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞、QBI-293A細(xì)胞
AtT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細(xì)胞、A549/ATCC細(xì)胞、MCF7/WT細(xì)胞
HCC95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN-c細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
SNU-484 Thawing人胃癌細(xì)胞系
NCI-N87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK細(xì)胞、NCI-H2196細(xì)胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞
LLC-MK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細(xì)胞、SN12CPM6細(xì)胞、NCI-H1734細(xì)胞
5-8F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞
JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞
Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞
BEL7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞
OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞
H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
BHT-101細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO211H細(xì)胞、DV-90細(xì)胞、JeKo 1細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBEo細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞、R 1610細(xì)胞
Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
RPMI-7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T HEECs細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞
HuH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-8細(xì)胞、DHL10細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞
NPA87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU 145細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞
McA-RH 8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞、SCL II細(xì)胞
SUM 149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細(xì)胞、SHEE細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞
CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
KY180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1353細(xì)胞、SW 1088細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞
DoHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
A9(Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-15細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞、PC-14細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞
P30-OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA468細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞、H441細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
SNU-484 Thawing人胃癌細(xì)胞系
LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
C33-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly03細(xì)胞、A-498細(xì)胞、NGP細(xì)胞
PASMCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞、DLD1細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
A704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP229細(xì)胞、HFLS細(xì)胞、Hs606細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞
WM 239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAEC細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞、HCT8細(xì)胞
OCM-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞
GM05372細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細(xì)胞、HF-91細(xì)胞、FaDu細(xì)胞
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