"SNU-449 Thawing人肝癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
SNU-449 Thawing人肝癌細胞系
細胞生長：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：５-１：１０傳代；每周２-３次
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SNU-449 Thawing人肝癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥Ｎ艺務(wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮樣；多角形
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
TOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細胞、H441細胞、CCRF-SB細胞
SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
HTori-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM6細胞、Hs 746T細胞、MUG-Chor1細胞
NCIH1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 480細胞、Tb 1 Lu細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞
MDAMB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-1細胞、PANC-08-13細胞、H128細胞
H-2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
NCIH2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細胞、WM115-mel細胞、SNU368細胞
HBE135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERIRb1細胞、UWB1.289細胞、DCS細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
IMR-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1細胞、WILL2細胞、MIN6細胞
MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
Sc-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
Sc-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞
Hs-940細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
SNU-449 Thawing人肝癌細胞系
B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
COLO 201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞
Hs611T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
NCI-H2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 180細胞、H22細胞、16HBE140細胞
SK-N-BE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細胞、NCI-H676B細胞、SUM159細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
ONS-76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3D4/21細胞、SC細胞、KRC Y細胞
NCIH526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
X63-Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU451細胞、H-196細胞、SHIN3細胞
Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞
B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
CF Pac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
NCI-H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-292細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞、HOS (TE85)細胞
TGW-nu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-251細胞、H-1954細胞、CHO-K1細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
Psi-2-DAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
SUD6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
SNU-449 Thawing人肝癌細胞系
2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
Y3-Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH1細胞、NBL-1細胞、ETCC007細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
HCGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
MDA.MB.231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 203細胞、VP267細胞、KY70細胞
SV40-MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
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