"SN12C Thawing人宮頸癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SN12C Thawing人宮頸癌細胞系
細胞生長:貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:2x10^4 cells/ml
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SN12C Thawing人宮頸癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
149 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞
SACCLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
Centre Antoine Lacassagne-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細胞、MV522細胞、MAC1細胞
SW954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS81細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞、HCC15細胞
DHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞、HCC0070細胞
293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞
PLCPRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-II細胞、QBC939細胞、L929(NCTC)細胞
C6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1975細胞、GNM細胞、MUTZ-3細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
Jeko1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細胞、NCI-H676細胞、SHZ-88細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH847細胞、CCD 841 CoN細胞、Functional Liver Cell-7細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-520細胞、ISHI細胞、GM12878細胞
SEG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H929細胞、MDA-435細胞、Jurkat E6細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
3AO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TH1細胞、H711細胞、RN細胞
MC3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1-Ag4-1細胞、Panc 02細胞、COLO 201細胞
MADISON LUNG TA-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK136細胞、MIA PaCa-2細胞、C666-1細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
SN12C Thawing人宮頸癌細胞系
H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
RINm-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞
A2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
CWR22Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2110細胞、Det 562細胞、HME-1細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
COLO 320F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
ST2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細胞、RS4:11細胞、Hs675細胞
SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
Strain L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
Toledo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細胞、H-295細胞、KP4細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細胞、NCI-SNU-1細胞、H-82細胞
Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
Colo-201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
GM03570細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Onda 11細胞、NIHOVCAR3細胞、Mouse Bladder Tumor line-2細胞
LoVo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細胞、SNU878細胞、NCI-H1105細胞
KNS42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞
C-127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
SW1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
G-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細胞、NCTC clone 1469細胞、H-647細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
Turbot Embryonic Cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
TALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO76細胞、293-H細胞、SHZ-88細胞
SN12C Thawing人宮頸癌細胞系
Y-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT2細胞、DITNC1細胞、CX-1細胞
CCD 1112SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細胞、OV1-P細胞、H-1650細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
MAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞
K7M2 wt細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
MDA-MB-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H23細胞、QSG7701細胞、H-1930細胞
NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
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