"SKG-IIIa Thawing人宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
SKG-IIIa Thawing人宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:2x10^4 cells/ml
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SKG-IIIa Thawing人宮頸癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
H1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_04_03細(xì)胞、ME180細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞
HTh 74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細(xì)胞、GM00637細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞
JAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA-1細(xì)胞、BL1339細(xì)胞、HEL-92.1.7細(xì)胞
H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞
PANC0813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293c18細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞
TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、RS1細(xì)胞
OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞
MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞
BAC1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD-2細(xì)胞、HBVP細(xì)胞、VB細(xì)胞
HPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW780細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞、PAMC82細(xì)胞
SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97-L細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細(xì)胞、3T3J2細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞
ReNcell CX細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM06.A1細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
CHP126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞、LS174細(xì)胞
U20-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞、HuT-102細(xì)胞
MDA-MB-134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432細(xì)胞、Tu212細(xì)胞、624-mel細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
SDBMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞
LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞
B16F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞
SKG-IIIa Thawing人宮頸癌細(xì)胞系
SKCO 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE32細(xì)胞、JJN3細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞
NCI-H87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7404細(xì)胞、RH-35細(xì)胞、COLO824細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細(xì)胞、VP303細(xì)胞、3T3-J2細(xì)胞
UACC893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-841細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞、CCRF-CEM/S細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
HDF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-330細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞
SK-MEL-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細(xì)胞、Ly8細(xì)胞、NEC細(xì)胞
MCFs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK (AD293)細(xì)胞、PG-4 S+L-細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞
RIN-m 14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1783細(xì)胞、SHG44細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞
R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞
HEK-293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK-2細(xì)胞、Reh細(xì)胞、SHG 44細(xì)胞
GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞
MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞
QBC(939)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
SJSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12T細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞、Th17細(xì)胞
HARAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞
H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞、293F細(xì)胞
MyLa 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞、mRTEC細(xì)胞
TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞
TE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RASMC細(xì)胞、NKM-1細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞
HcerEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞
NCI-H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細(xì)胞、KYSE 510細(xì)胞、CNE1細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞
H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C918細(xì)胞、THP1細(xì)胞、HGC27細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
MH7A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOK細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞、H1793細(xì)胞
SKG-IIIa Thawing人宮頸癌細(xì)胞系
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
LMTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞
HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞
BE(2)C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149PT細(xì)胞、NT2/D1細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞
OCI-Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞
L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞
SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細(xì)胞、H2023細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞
NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
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