"NCM460 Thawing結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCM460 Thawing結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵危宜腊?。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因?yàn)檫@個東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話，這個細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCM460 Thawing結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來細(xì)胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進(jìn)展，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實(shí)驗(yàn)室。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)謹(jǐn)慎復(fù)雜，需要的實(shí)驗(yàn)設(shè)備種類繁多，下面就一些動物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細(xì)胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實(shí)際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標(biāo)準(zhǔn)方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細(xì)胞毒性越小，越利于細(xì)胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會直接導(dǎo)致細(xì)胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對于不需要長期凍存的細(xì)胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細(xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。移液器和細(xì)胞培養(yǎng)的大量耗材：細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
Mv 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sf-21細(xì)胞、C4-1細(xì)胞、RL-65細(xì)胞
NCIH1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 B細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞
BE2-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H209細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞、COLO679細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
U-373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-132細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞、GS9L細(xì)胞
TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞
ACCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Skin 1細(xì)胞、143B細(xì)胞、SW626細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
IGROV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDF-a細(xì)胞、NCI-Hut 125細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞
GM12878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-12細(xì)胞、COR-L26細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
PTK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIII細(xì)胞、293-GP細(xì)胞、H-2444細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞、PL45細(xì)胞
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
HGF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAN 02細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
624mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206細(xì)胞、K-562細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞
KTCTL-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
CORL26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-239A細(xì)胞、KMS11細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞
NCM460 Thawing結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
IOSE-Mar細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-A細(xì)胞、GM02132細(xì)胞、SEG1細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
GH 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞
VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞
MCF7-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS-1細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞
RERFLCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細(xì)胞、Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞
MAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2B細(xì)胞、HCC-1428細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞
NCIH1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞
SKGIIIA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain L-929細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞、H1672細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
COLO206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
RIN-m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIN87細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞、639V細(xì)胞
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
NCI-H2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO III細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞、KAT-5細(xì)胞
HEL92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMEC細(xì)胞、MDA157細(xì)胞、GM05372細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
MGC-803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞
P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1088細(xì)胞、Alexander細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞
HS-729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞、RPMI 6666細(xì)胞
Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞
FD-LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細(xì)胞、DK-MG細(xì)胞、C127細(xì)胞
Cates 1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP2細(xì)胞、67NR細(xì)胞、A549細(xì)胞
CCF-STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞
ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞
HFLS-RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa-T細(xì)胞、J774 A.1細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞
NCM460 Thawing結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
KM12 SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、SCH細(xì)胞、GAK細(xì)胞
KM12 SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、SCH細(xì)胞、GAK細(xì)胞
Hs611T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F0細(xì)胞、MFD-1細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
HTR-8/SV-neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T24細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞
MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞
HEK-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ES細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞
Clone 166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-33Co細(xì)胞、COLO 320F細(xì)胞、SV40 MES 13細(xì)胞
PC3M-1E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMx721.174.T2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞
AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞
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