"NCI-H1299 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料：這株細胞來源于一個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。患者接受了初期放療。細胞均一性的部分缺失p５３蛋白，并缺少p５３蛋白表達。細胞可以合成０.１pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液釋放肽(GRP)。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
NCI-H1299 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代；３天傳代一次。
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H1299 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉毎劳觥Ｎ艺務(wù)剛€人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞形態(tài)特性：上皮樣；多角形
UMUC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
Anip 973細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE21細胞、CCD-966SK細胞、Co 115細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
PC-3/M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞
SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞
686LN-M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TB-1 Lu細胞、PLC-PRF-5細胞、E6-1細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細胞、Y-1細胞、SK MEL 5細胞
UMUC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCAEC細胞、NS-20Y細胞、CTLL2細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
Jurkat-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney-21細胞、WM-451Lu細胞、NIH 3T6細胞
EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
VCaP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細胞、LNCaP-C4-2細胞、SKOV-3細胞
NCI-H1299 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
SNUC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC3細胞、PY8119細胞、AML-EOL-1細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞
DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
C-Lu65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細胞、RCC10細胞、NCIH2009細胞
Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
U-118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
KGN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
JB-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
SK-ES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
WERI-Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
BC-027細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
S37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
L-428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細胞、SKGIIIA細胞、SNU-638細胞
CTLL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14細胞、CemT4細胞、KLM-1細胞
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細胞、LTEP-a-2細胞、PC3M細胞
Henrietta Lacks cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞
NCI-H1299 Thawing人非小細胞肺癌細胞系
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
ME16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H250細胞、Hs-611-T細胞、3T3J2細胞
NCIH460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
SW948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞
HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1838細胞、H157細胞、SK 1細胞
MARC 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
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