"KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長：貼壁
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：５傳代
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細胞癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
L-M (TK-)細胞系相關產(chǎn)品：Sp2/0細胞、SKGT2細胞、SKG IIIa細胞
RCC10 RGB細胞系相關產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
MLOY4細胞系相關產(chǎn)品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
293F細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
H-II-E-C3細胞系相關產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
H-146細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
CCD-112 CoN細胞系相關產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
130-T細胞系相關產(chǎn)品：G361-mel細胞、Pt-K2細胞、SUM 159PT細胞
WML2細胞系相關產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
CAL 120細胞系相關產(chǎn)品：CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
TE-15細胞系相關產(chǎn)品：MV4:11細胞、CHOS細胞、NCI-H820細胞
HL-60細胞系相關產(chǎn)品：Panc-813細胞、CX-1細胞、KNS62細胞
T24細胞系相關產(chǎn)品：KCL22S細胞、MDA PCa 2b細胞、RGC5細胞
HCT-116細胞系相關產(chǎn)品：TGW-I-nu細胞、ssMCF7細胞、RCC-JF細胞
A549-Taxol細胞系相關產(chǎn)品：MLM細胞、KYSE410細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞
SU-86-86細胞系相關產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
H-1792細胞系相關產(chǎn)品：Detroit 562細胞、NTERA-2 clone D1細胞、HuPT3細胞
WM 239-A細胞系相關產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
MM96L細胞系相關產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
MM96L細胞系相關產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
SNK-1細胞系相關產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
MDA-MB-435S細胞系相關產(chǎn)品：Hs_578t細胞、EoL-1 cell細胞、G402細胞
P3X63 Ag8細胞系相關產(chǎn)品：H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞
Hs 294T細胞系相關產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細胞癌細胞系
H-128細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
bEnd.3[BEND3]細胞系相關產(chǎn)品：H1819細胞、FL83B細胞、BC3 H1細胞
A 2780 CP細胞系相關產(chǎn)品：SW-620細胞、SKNBE-1細胞、NCI-H1838細胞
CORL51細胞系相關產(chǎn)品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
NCIH1573細胞系相關產(chǎn)品：CT26細胞、KYSE50細胞、MOVAS細胞
KMM1細胞系相關產(chǎn)品：RMS1598細胞、SACCLM細胞、Hs-578T細胞
TGW-nu細胞系相關產(chǎn)品：SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
KHYG1細胞系相關產(chǎn)品：no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞
LA-N-6(OAN)細胞系相關產(chǎn)品：Mel RM細胞、MHCC97H細胞、NG 108-15細胞
LL2細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
ABC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關產(chǎn)品：L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
HBVP細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
T-47-D細胞系相關產(chǎn)品：BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
CORL88細胞系相關產(chǎn)品：H-1819細胞、Vx2細胞、MESSA/Dx5細胞
786-0細胞系相關產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
SNT-8細胞系相關產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
LS123細胞系相關產(chǎn)品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
NCI-H596細胞系相關產(chǎn)品：MDCK supertube細胞、Vero C1008細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞
Hs739T細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
Case 3細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞
SN4741細胞系相關產(chǎn)品：Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞
526細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-52細胞、LUDLU-1細胞、H548細胞
NHLF細胞系相關產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
DITNC1細胞系相關產(chǎn)品：GES-1細胞、LU165細胞、HEK-AD293細胞
SCL-2細胞系相關產(chǎn)品：BNCL-2細胞、LNCaP subline C4-2細胞、PIG3細胞
SW-1417細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
NG10815細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
OCI-Ly 10細胞系相關產(chǎn)品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
L615細胞系相關產(chǎn)品：GM02132C細胞、KOSC-2細胞、Earles's cells細胞
H-1105細胞系相關產(chǎn)品：UWB1289細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
SACC-83細胞系相關產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
KYSE-270 Thawing人食道鱗狀細胞癌細胞系
MKN 28細胞系相關產(chǎn)品：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
NBLAN5T細胞系相關產(chǎn)品：KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
P3X63Ag8細胞系相關產(chǎn)品：HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
VP 267細胞系相關產(chǎn)品：Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、ELD-1細胞、GM03190細胞
SNGM細胞系相關產(chǎn)品：H2009細胞、RT4-D6-P2T細胞、293-FT細胞
CAOV4細胞系相關產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
H2107細胞系相關產(chǎn)品：38C-13細胞、HIT T-15細胞、KB細胞
My-La 2059細胞系相關產(chǎn)品：U-266 AR1細胞、H345細胞、MIMVEC細胞
MN60細胞系相關產(chǎn)品：COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
GM02132細胞系相關產(chǎn)品：SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞
NCI-H2106細胞系相關產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
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