"KP-4 Thawing人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
KP-4 Thawing人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
KP-4 Thawing人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類(lèi)、血清種類(lèi)和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類(lèi)，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時(shí)，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對(duì)細(xì)胞而言差異極大，請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類(lèi)培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過(guò)冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類(lèi)和濃度，于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)取１０ml培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
NCIH1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU-565細(xì)胞、H498細(xì)胞、H-847細(xì)胞
OVCAR.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-446細(xì)胞、HCM細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞
Hs 729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Hep1細(xì)胞、YES-2細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞
H-1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit 562細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞、HuPT3細(xì)胞
T241細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo 1細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
huH 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞、343MG細(xì)胞
U2932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞、HUT-226細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
HPaSteC(HPSC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H-10T1/2細(xì)胞、MyLa 2059細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞
GM05887細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL.2H3細(xì)胞、H-209細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞
HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞
KNS42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4II細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞、NCI-H526細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
HEL 92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA104細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞、T-24細(xì)胞
H-2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kelly細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞、CMT64細(xì)胞
OV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細(xì)胞、S37細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
BNL.CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFK-1細(xì)胞、MA-104細(xì)胞、NCIH244細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
LOU-NH91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-33細(xì)胞、MDA-MB-468細(xì)胞、RINm-5F細(xì)胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8402細(xì)胞、NIH3T3細(xì)胞、C 643細(xì)胞
Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1569細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
HCGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3H-1細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞
HCT/Taxo1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-D1細(xì)胞、RKN細(xì)胞、NW-MEL-38細(xì)胞
KP-4 Thawing人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌細(xì)胞系
C1R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293細(xì)胞、UMNSAH-DF1細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞
SK UT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細(xì)胞、HD11細(xì)胞、MN60細(xì)胞
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞
L02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1651細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞、B958細(xì)胞
RSC 96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞
PANC-10-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞
HEK293T/17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNSH細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞
CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
DBTRG-05MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr細(xì)胞、HB611細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞
COLO 394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRPEpiC細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞
brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞
Rat1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、SW 780細(xì)胞
Caco-2/ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1944細(xì)胞、R D細(xì)胞、SUD4細(xì)胞
H-2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10--RED細(xì)胞、H341細(xì)胞、GM04671細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞
CT 26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI/ADR-RES細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞、GM-346細(xì)胞
P31FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-16細(xì)胞、ME1細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞
Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞
P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
Hs 294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 clone D1細(xì)胞、OVCAR.5細(xì)胞、CHL細(xì)胞
HuCCT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞
KE39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT8810細(xì)胞、ChaGo K-1細(xì)胞、HBE 135-E6/E7細(xì)胞
HELA-GFP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細(xì)胞、NCI-128細(xì)胞、HuPT4細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
SJSA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PECAPJ34細(xì)胞、HAC-84細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞
NCIN87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
KP-4 Thawing人胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌細(xì)胞系
SK-N-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、DMS-79細(xì)胞、STC-1細(xì)胞
HRIF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞
U266 B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH727細(xì)胞、NHA細(xì)胞、H920細(xì)胞
MC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QG56細(xì)胞、H-1238細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞
GP5d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞
50.B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21G細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞、SW579細(xì)胞
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞
JHH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細(xì)胞、GM03190細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞
L2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D562細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞
HaCaT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞
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