"COLO 680N Thawing人食管鱗狀癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
COLO 680N Thawing人食管鱗狀癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類(lèi)型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COLO 680N Thawing人食管鱗狀癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)部分
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤(pán),則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞
NHDF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 33細(xì)胞、UCLA-SO-M21細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞
KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
OVSAHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-mel細(xì)胞、Hs683T細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞
JROECL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-411N細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞
AE1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 357細(xì)胞、WM-266-mel細(xì)胞、MM1S細(xì)胞
H841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細(xì)胞、H-2030細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細(xì)胞、M109細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞
Y-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞、HEC251細(xì)胞
HO8910細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-1B細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞、H-2330細(xì)胞
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
hs 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、RBL2H3細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
MGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 115細(xì)胞、Hs675細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
COLO 680N Thawing人食管鱗狀癌細(xì)胞系
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
Human Epithelioma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1171細(xì)胞、SNK6細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞
H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL27細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞
G-401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH889細(xì)胞、OC316細(xì)胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
K-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
KAT-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2030細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞、CMT93細(xì)胞
SVG p12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1688細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞、CAL78細(xì)胞
MLOY4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC615.3細(xì)胞、GM346細(xì)胞、GM00346細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
FRTL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPASMC細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞
NCI H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly10細(xì)胞、NW-38細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞
FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞
H-1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細(xì)胞、H-2135細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
SGC7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-H細(xì)胞、SUM190PT細(xì)胞、Co-115細(xì)胞
D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
U251n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-9細(xì)胞、NCIH748細(xì)胞、H-1672細(xì)胞
H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-2細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、HSC4細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞
NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
QGY7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細(xì)胞、CX1細(xì)胞、AM細(xì)胞
MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞
Pa17C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞
Hs840T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn5B14細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞、HT-55細(xì)胞
PANC 1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEP2D細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞、JVM-3細(xì)胞
U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞
Huh-7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞
X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞、H1930細(xì)胞
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞
COLO 680N Thawing人食管鱗狀癌細(xì)胞系
KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
ASH3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞、MM1細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞
U-373MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細(xì)胞、FU-97細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞
CCC-HPF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rHSC-99細(xì)胞、COLO-205細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞
H-1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPECJ2細(xì)胞、K7M2細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞
PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
FRTL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPASMC細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞、FDCP-1細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-81細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞
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