"COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞系是１９５７年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的７０歲男性白人的腹水中分離的。該病人在取腹水樣品前已用５-尿嘧啶治療４~６周。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性；產(chǎn)生CEA、IL１０。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
OV 1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細胞、B6Tert-1細胞、RL細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
Walker-256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R細胞、EFM192細胞、MV(4;11)細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
MiaPaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞
Y3.AG.1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
NCI-H322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-T4細胞、MCA205細胞、BT 20細胞
SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞
Hs 578.Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細胞、MPC-5細胞、HL-60細胞
HO8910/PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細胞、U-118-MG細胞、MUS-M1細胞
COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細胞、SUDHL-6細胞、DAKIKI Clone 1細胞
MRASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、BOWES細胞、JEKO細胞
HPAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細胞、FBHE細胞、SK-SH-SY5Y細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
MuM-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細胞、KYSE 70細胞、CL34細胞
MPC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞
SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞
H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細胞、HT55細胞、NL20細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞
293 Ad5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞
SK-N-FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞
SUM149-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
H847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細胞、Huh 7.5.1細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞
HL7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
SCC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞
Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞
NCIH208細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、M-G63細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
GBCSD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細胞、IGROV細胞、Hs 274.T細胞
293S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
LUDLU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
NCC-IT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細胞、MGHU1細胞、SUP-T1細胞
SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
PK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細胞、MM1S細胞、BEAS-2B細胞
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
ARH 77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-14細胞、MDA-453細胞、HET1A細胞
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
Hs294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
IB-RS-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE細胞、RIMEC細胞、MDA-MB-435-S細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
LNT-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
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