"COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞系是１９５７年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的７０歲男性白人的腹水中分離的。該病人在取腹水樣品前已用５-尿嘧啶治療４~６周。角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性；產(chǎn)生CEA、IL１０。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開(kāi)紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒(méi)用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買(mǎi)來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒(méi)了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過(guò)程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞
BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細(xì)胞、DLD1細(xì)胞、LA4細(xì)胞
Walker-256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R細(xì)胞、EFM192細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞
CT26.WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1341細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞
MiaPaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞
WM-266-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞
H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞
Y3.AG.1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、MES-SA/Dx5細(xì)胞、TALL 1細(xì)胞
NCI-H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-T4細(xì)胞、MCA205細(xì)胞、BT 20細(xì)胞
SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞
COV-362細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAEC細(xì)胞、MKN45細(xì)胞、PLB 985細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、JEKO細(xì)胞
HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞
LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細(xì)胞、PK-13細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
OVCAR 420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細(xì)胞、GM01232細(xì)胞、Hs675T細(xì)胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293H細(xì)胞、MDA415細(xì)胞、HPAC細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞
SAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10-Clone-4細(xì)胞、NPA細(xì)胞、H-650細(xì)胞
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞
H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV1細(xì)胞、HT55細(xì)胞、NL20細(xì)胞
MDA-MB-231 #4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞、ROS17/28細(xì)胞
293 Ad5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞
SK-N-FI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞
SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞
NCI-H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞
CAL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、HSC細(xì)胞
Co 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細(xì)胞、KNS81細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞
HEH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細(xì)胞、SNU119細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞
COLO201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞、Karpas422細(xì)胞
SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞
H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO細(xì)胞、Huh 7.5.1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞
HL7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞、H-1373細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
NCIH208細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6565細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞、M-G63細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞
GBCSD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
MG-63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細(xì)胞、NRK-52E細(xì)胞、FK81細(xì)胞
LUDLU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC9204細(xì)胞、CCD841CoTr細(xì)胞、NPC-TW-039細(xì)胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT22細(xì)胞、U 266細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞
HCC1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞、H-3255細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞
PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
COLO 205 Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
SW 1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE12細(xì)胞、NB19細(xì)胞、R2C細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞
ARH 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-14細(xì)胞、MDA-453細(xì)胞、HET1A細(xì)胞
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞
IB-RS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞
C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
BXPC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARPE-19細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、H-7721細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
HuH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel526細(xì)胞、LC1細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞
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