"COLO 205 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞背景資料:該細胞系是1957年由T.U.Sample等從患有結(jié)腸癌的70歲男性白人的腹水中分離的。該病人在取腹水樣品前已用5-尿嘧啶治療4~6周。角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性;產(chǎn)生CEA、IL10。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞 RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞 MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞 細胞生長:貼壁 COLO 205 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細胞傳代方法:1:2傳代 PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞 U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞 NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞 UCLA-SO-M20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2935細胞、Henrietta Lacks cells細胞、BC-3H-1細胞 ECV304細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82細胞、3T3L1細胞、GOS-3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 COLO 205 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 P-388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞 ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞 NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞 3T3-442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-MeWo細胞、PANC 327細胞、RKO-AS45-1細胞 Jurkat-FHCRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-1細胞、SKLMS1細胞、H-508細胞 NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞 TE-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞 CHO cell clone K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞 H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞 DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞 COLO 205 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞 207細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOS細胞、Panc-03.27細胞、HEC1-A細胞 SNU423細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細胞、GOTO細胞、EFM192A細胞 EFM19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC78細胞、MC3T3細胞、SKRC-52細胞 NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞 Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞 U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞 H-4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞 HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞 NCI-H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞 293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc327細胞、BC3 H1細胞、C4-2 B細胞 RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞 CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞 HTR8/SVneo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS7細胞、P19細胞、Hela-Ap-1細胞 LA-N-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細胞、HLEC-SRA 01/04細胞、KLN 205細胞 COR-L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞 SN4741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞 MOLT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細胞、VeroE6細胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細胞 OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞 P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞 BTI-Tn5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 281.T細胞、CNE2細胞、LNCaP-ATCC細胞 OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞 H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞 BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細胞、MDA-MB-435-S細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞 Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞 SK-MEL-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞 RPMI #8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞 NCI-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT細胞、NCIH378細胞、HCC0038細胞 FDCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞 HCA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞 MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞 Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞 SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞 KYSE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1573細胞、BJ1細胞、H1299細胞 Panc-327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-12細胞、SN12C細胞、SNU-C2B細胞 624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞 MUTZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞 D407 RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞 LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞 H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞 SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞 BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞 SKMEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞 ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞 SNB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞 CAL148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895T細胞、QG-56細胞、SKOV-433細胞 RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞 Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞 LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞 COLO 205 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 OCM1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞 GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 4細胞、HUT-125細胞、526mel細胞 FK81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-10細胞、KY-270細胞、H69細胞 NCIH847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPM2細胞、GM06141B細胞、Normal Rat Kidney細胞 "
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