"VMRC-RCZ Thawing人腎細胞癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
VMRC-RCZ Thawing人腎細胞癌細胞系
細胞生長:貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據(jù)感染細菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象!可在培養(yǎng)液中加相應的抗生素處理;霉菌:培養(yǎng)液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質(zhì),37度孵箱培養(yǎng)2-3天,仍清亮,但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態(tài)變差,用酸銅溶液擦拭CO2孵箱內(nèi),再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時,使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后,再移入細胞。孵箱應定期清潔(2月左右),尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外燈照。預防霉菌污染,可在培養(yǎng)基里加3u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗;但細胞一旦污染,很難挽救,制霉菌素或D或雙抗都于事無補,建議舍棄該污染細胞,將環(huán)境徹底消毒,如果所有細胞都污染,可能是系統(tǒng)污染,檢查一下培養(yǎng)基和器材,如果只是個別污染,可能是操作問題,就要注意操作。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:6傳代
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
VMRC-RCZ Thawing人腎細胞癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學對細胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng),尤其是細胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細胞的質(zhì)量,后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
Pa18C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞
MES-SA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Glioma-261細胞、B16-F1細胞、HANK1細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
HT144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4.2細胞、COLO829細胞、HEK 293-H細胞
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
SKES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細胞、WRL 68細胞、KMB-17細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
NCI-H1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC26細胞、H2030細胞、D-283 Med細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、SW620細胞、Mahlavu細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WML2細胞、CT-26細胞、PLA 802細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
WIL2 Secreting細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-441細胞、SNU-1細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
SK-N-BE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞
KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
HuH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-8細胞、DHL10細胞、NCI-H2291細胞
VMRC-RCZ Thawing人腎細胞癌細胞系
Vero 76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
TE-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細胞、C33A細胞、HEC1A細胞
130 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2106細胞、3396細胞、MDAMB231細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
Colon-26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN 382細胞、PM6細胞、COLO 357細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
OCI AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細胞、SUNE1細胞、GM00346B細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
MDCK.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
AN3 CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-2細胞、Ishikawa細胞、COLO 679細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞
HCC38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2171細胞、Hs 766.T細胞、MGC803細胞
MZCRC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
HGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
SiHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
HOMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
Mono Mac 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP-10細胞、KE 37細胞、Leukemia 1210細胞
J774.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞
VMRC-RCZ Thawing人腎細胞癌細胞系
RPMI 7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細胞、SR-786細胞、SN12C-PM6細胞
Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞
K1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H 10T1/2細胞、Hs 742.T細胞、LI7細胞
RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞
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