"VMRC-RCZ細胞：人腎細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
U138細胞系相關產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
H-4-II-E細胞系相關產(chǎn)品：8505C細胞、SNUC2A細胞、U-373-MG細胞
HIBEpiC細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293A細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞、H2107細胞
U266細胞系相關產(chǎn)品：MV-4-11細胞、H1993細胞、AZ-521細胞
TYKnu細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
LAD 2細胞系相關產(chǎn)品：GC-1細胞、SN4741細胞、Hs 746T細胞
MRAEC細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
H2126細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
Turbot Embryonic細胞：細胞系相關產(chǎn)品：RAOEC細胞、SKNEP細胞、Caco-2/BBe細胞
LNCaP subline C4-2細胞系相關產(chǎn)品：Swiss3T3細胞、SK_HEP1細胞、CHO/dhFr-細胞
NCI H747細胞系相關產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
U118MG細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
LI7細胞系相關產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
MDA-PCa-2b細胞系相關產(chǎn)品：H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞
SNU620細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
SNU620細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞
ECC12細胞系相關產(chǎn)品：HEK-EBNA細胞、U-118 MG細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞
NCI-H378細胞系相關產(chǎn)品：WRL-68細胞、RC-4B細胞、KHYG細胞
LS 513細胞系相關產(chǎn)品：H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞
H-2286細胞系相關產(chǎn)品：WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
CT26WT細胞系相關產(chǎn)品：RAW-264.7細胞、hRMECs細胞、P3JHR-1細胞
Clone Y-1細胞系相關產(chǎn)品：C-Lu65細胞、H1666_DA細胞、CCLP1細胞
Hs 742.T細胞系相關產(chǎn)品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
SW-1573細胞系相關產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞
OCI-AML4細胞系相關產(chǎn)品：HCC-94細胞、F36P細胞、Colo320細胞
KB細胞系相關產(chǎn)品：T-ALL1細胞、H-2171細胞、SUM-159PT細胞
SuperTube細胞系相關產(chǎn)品：H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
CCRF CEM細胞系相關產(chǎn)品：ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞
MDA-MB415細胞系相關產(chǎn)品：VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
RCC-10細胞系相關產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
HT-22細胞系相關產(chǎn)品：HCC 70細胞、Lewis lung carcinoma line 1細胞、Walker 256細胞
NCI-1155細胞系相關產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
PE/CA-PJ34細胞系相關產(chǎn)品：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
SHG44細胞系相關產(chǎn)品：HEK293S細胞、SGC-7901/DDP細胞、T24(ECV304)細胞
MARC 145細胞系相關產(chǎn)品：CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
H-1688細胞系相關產(chǎn)品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
EBC1細胞系相關產(chǎn)品：Panc 04.03細胞、NK 10a細胞、KNS-62細胞
NB4細胞系相關產(chǎn)品：Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
HCC-2108細胞系相關產(chǎn)品：Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞
C-127細胞系相關產(chǎn)品：McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
HuH6細胞系相關產(chǎn)品：Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
639V細胞系相關產(chǎn)品：Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞
RBL.2H3細胞系相關產(chǎn)品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
MFM223細胞系相關產(chǎn)品：TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞
ESC-410細胞系相關產(chǎn)品：HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
Natural Killer-92細胞系相關產(chǎn)品：BrCL15細胞、BEL7405細胞、H-865細胞
HSC-4細胞系相關產(chǎn)品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
CALU1細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
SK-ES-1細胞系相關產(chǎn)品：CD18/HPAF細胞、GCT細胞、N87細胞
NG-108-15細胞系相關產(chǎn)品：TC-1 [Mouse lung]細胞、CL11細胞、BNL CL.2細胞
Intestinal Porcine Epithelial細胞：-1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
Rat podocyte細胞系相關產(chǎn)品：WM 239-A細胞、HCC2185細胞、CHL-1細胞
OCI/AML-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
OCI/AML-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
HEK-293-F細胞系相關產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
CALU1細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
NCI-H322T細胞系相關產(chǎn)品：Rh30細胞、H-660細胞、BC-PAP細胞
A2058細胞系相關產(chǎn)品：SW-480細胞、AMC-HN8細胞、A7r5細胞
H-2009細胞系相關產(chǎn)品：NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞
HLMVEC細胞系相關產(chǎn)品：MKN 7細胞、ML-2細胞、HPaSteC(HPSC)細胞
EOC 20細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞
LLC-PK-1細胞系相關產(chǎn)品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
D562細胞系相關產(chǎn)品：MIA-PaCa-2細胞、HFT8810細胞、SHSY5Y細胞
SNU-C1細胞系相關產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
Wien133細胞系相關產(chǎn)品：CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞
IPLB-SF 21AE細胞系相關產(chǎn)品：SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞、HCC-2108細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關產(chǎn)品：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
EB-1細胞系相關產(chǎn)品：SUP-M2細胞、COLO320/DM細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
H841細胞系相關產(chǎn)品：B16 F1細胞、H-2030細胞、Hs839T細胞
HIBEC細胞系相關產(chǎn)品：NCI-BL1339細胞、IMR 32細胞、OVSAHO細胞
MDA435細胞系相關產(chǎn)品：266 Bl細胞、TE8細胞、PCI-SG231細胞
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