"NCI-H774 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
NCI-H774 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
接收細(xì)胞相關(guān)問題：如不能在收到細(xì)胞后及時(shí)操作細(xì)胞，T２５及離心管發(fā)貨的細(xì)胞將可以消毒后在３７度過夜，血清發(fā)貨的細(xì)胞在室溫下靜置１-２天(注意不要放冰箱)，干冰發(fā)貨的可以在確認(rèn)干冰未完全升華時(shí)將細(xì)胞直接放回液氮或者-８０度冰箱，若干冰完全升華，請(qǐng)即刻復(fù)蘇細(xì)胞。T２５瓶及離心管在培養(yǎng)箱平衡是為了讓細(xì)胞盡快適應(yīng)培養(yǎng)箱環(huán)境，同時(shí)使部分因運(yùn)輸導(dǎo)致脫落的細(xì)胞貼壁，此步驟非常必要。T２５瓶如果在顯微鏡下可以看到部分不貼壁的細(xì)胞，可以收集上清后離心(１２００rpm，５min)后，將沉淀用新的培養(yǎng)基重懸后接種至新的培養(yǎng)瓶或皿中。部分細(xì)胞在運(yùn)輸過程中，由于不斷震蕩及環(huán)境不適，可能導(dǎo)致細(xì)胞破碎死亡，從而使培養(yǎng)基中漂浮很多細(xì)胞碎片及顆粒狀物質(zhì)。這種情況下，平衡后，貼壁細(xì)胞用PBS洗兩遍再加新的培養(yǎng)基培養(yǎng)或者傳代至新瓶中培養(yǎng)即可；懸浮細(xì)胞可以離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，并用PBS重懸后再離心一次，再用新的培養(yǎng)基重懸并接種細(xì)胞。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：每周換液２次。
傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H774 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
PLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-12細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞、SSP-25細(xì)胞
Ramos 2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSI/1-Ag4-1細(xì)胞、Hx147細(xì)胞、no.11細(xì)胞
V 79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細(xì)胞、LS 123細(xì)胞、Microbiological Associates-104細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
UM-RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細(xì)胞、B95.8細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞
Panc 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA317細(xì)胞、TE5細(xì)胞、OCI-Ly01細(xì)胞
OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞
CL34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、P-388細(xì)胞
SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
SKMEL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-20細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞、BAC1.2F5細(xì)胞
SK LU 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT6細(xì)胞、LA-N-6(OAN)細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞
UCLA-SO-M20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2935細(xì)胞、Henrietta Lacks cells細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
IGR.OV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1197細(xì)胞、C38細(xì)胞、GM17346細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
NCI-H774 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞
OVCAR5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細(xì)胞、C3H10T1/2 clone8細(xì)胞、H524細(xì)胞
C4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細(xì)胞、D-341 Med細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞
CoC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324細(xì)胞、L540細(xì)胞、74Int細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞
SKCO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FAT細(xì)胞、EU-3細(xì)胞、293GP細(xì)胞
HO8910/PM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac12F5細(xì)胞、U-118-MG細(xì)胞、MUS-M1細(xì)胞
LA4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
PLC-8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：aTC1-6細(xì)胞、BT-B細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞
WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞
NCI-322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2171細(xì)胞、H226細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞
Lu-165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細(xì)胞、HuO9細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞
JROECL 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATOIII細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、MeT5A細(xì)胞
H-1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPECJ2細(xì)胞、K7M2細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞
Beta-TC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-F細(xì)胞、2T細(xì)胞、OCI-Ly10細(xì)胞
Kit225/K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J111細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞
VCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs274T細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞、SKOV-3細(xì)胞
H-146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1359細(xì)胞、H64細(xì)胞、KALS1細(xì)胞
SHIN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ball 1細(xì)胞、N2a細(xì)胞、HTR8細(xì)胞
Hs683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-F細(xì)胞、LK 2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞
Hs-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞、SNU5細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
H4-IIE-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 27細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞
RPMI-8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
NCI-H774 Thawing人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33A細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞、293-H細(xì)胞
DC2.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2-DAP細(xì)胞、PK136細(xì)胞、HNSC細(xì)胞
C3H10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細(xì)胞、PCI-04B細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞
Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞
RN-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BSC-1細(xì)胞、X63細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞
NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞
HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞
CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞
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