"NCI-H774 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
MDA435細胞系相關產(chǎn)品：NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
P3X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品：8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞
H1184細胞系相關產(chǎn)品：OV-CA 432細胞、KCL22S細胞、YAC細胞
TE7細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H774 Cell:人小細胞肺癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２次。
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SU.86.86細胞系相關產(chǎn)品：D6P2T細胞、U031細胞、IMR90細胞
B16/F1細胞系相關產(chǎn)品：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞
Kasumi-6細胞系相關產(chǎn)品：WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
CORL279細胞系相關產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
T 24細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
細胞生長特性：懸浮生長
NCI-H774 Cell:人小細胞肺癌細胞系
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
GM05887A細胞系相關產(chǎn)品：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞
MMAc-Serum Free細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly18細胞、TE-4細胞、KTCTL140細胞
SW48細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
KNS62細胞系相關產(chǎn)品：LLC-MK-2細胞、AML12細胞、SKNEP-1細胞
MESSA-DX5細胞系相關產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
MONO-MAC 6細胞系相關產(chǎn)品：H-2135細胞、P30/OHK細胞、EOC 20細胞
BT.549細胞系相關產(chǎn)品：H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
NCI-H774 Cell:人小細胞肺癌細胞系
P31 FUJ細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB453細胞、PAMC82細胞、NT2/D1細胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞
PE CA PJ34細胞系相關產(chǎn)品：H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
L-6TG細胞系相關產(chǎn)品：P-2003細胞、A875細胞、GS-9L細胞
RM-1細胞系相關產(chǎn)品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
LS-123細胞系相關產(chǎn)品：Hs 739.T細胞、HEK293-F細胞、H2330細胞
WERI-Rb 1細胞系相關產(chǎn)品：C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
AN3-CA細胞系相關產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
OKT3細胞系相關產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
OKT3細胞系相關產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
OCILY-3細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞
OKa-C-1細胞系相關產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
BIC1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1048細胞、TR 146細胞、AHH-1細胞
HGBEC細胞系相關產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
SkChA1細胞系相關產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
JM1細胞系相關產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
NCI.H522細胞系相關產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
KYSE70細胞系相關產(chǎn)品：TF-1細胞、H-1838細胞、52PE細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞系相關產(chǎn)品：SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞
J774 A1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 895.T細胞、C-26細胞、OCIAML3細胞
SN12PM6細胞系相關產(chǎn)品：COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞
Hela-mock細胞系相關產(chǎn)品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
NCI-H2198細胞系相關產(chǎn)品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
16HBEo-細胞系相關產(chǎn)品：NCIH3255細胞、MH7A細胞、aNK細胞
Hs-274-T細胞系相關產(chǎn)品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
KASUMI1細胞系相關產(chǎn)品：9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
HeLa.S3細胞系相關產(chǎn)品：ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞
TE-32細胞系相關產(chǎn)品：P3-Jiyoye細胞、hTERT-RPE細胞、EVSAT細胞
EnCa1細胞系相關產(chǎn)品：K7M2-WT細胞、CHL-11細胞、NCI-H2023細胞
EAhy 926細胞系相關產(chǎn)品：SU86_86細胞、SK-MES-1細胞、huH 1細胞
NCIH460細胞系相關產(chǎn)品：Panc02-H0細胞、COLO-357細胞、NCIH292細胞
H1770細胞系相關產(chǎn)品：H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞
VK2細胞系相關產(chǎn)品：COR-L26細胞、H2170細胞、H2171細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
H-2347細胞系相關產(chǎn)品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
CWR22-R1細胞系相關產(chǎn)品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
CAL-12T細胞系相關產(chǎn)品：BEL-7404細胞、RF/6A細胞、NCI-HUT-292細胞
OPM2細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
ECC-10細胞系相關產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細胞、Z138細胞、MDA-MB436細胞
NPC-TW-039細胞系相關產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
TE14細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2 clone 8細胞、OVCAR10細胞、7404細胞
AtT-20細胞系相關產(chǎn)品：H-1436細胞、HConEpic細胞、A-253細胞
NCI-H774 Cell:人小細胞肺癌細胞系
ABE8.1/2細胞系相關產(chǎn)品：Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
Panc813細胞系相關產(chǎn)品：Vero-E6細胞、HPB-ALL細胞、SuDHL 2細胞
NRK clone 52E細胞系相關產(chǎn)品：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
RWPE-2細胞系相關產(chǎn)品：C 643細胞、SF-539細胞、NT2D1細胞
RTMC細胞系相關產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
OVCAR-420細胞系相關產(chǎn)品：LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞
CTV-1細胞系相關產(chǎn)品：P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
L-cell細胞系相關產(chǎn)品：MC116細胞、TW-039細胞、NCI-H1755細胞
ECV 304細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
UM-UC3細胞系相關產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
KYSE 510細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1105細胞、RK 13細胞、Hs737T細胞
T8細胞系相關產(chǎn)品：Lu-65細胞、RGM1細胞、Panc 08.13細胞
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關鍵字： NCI-H774 Cell:人小細胞肺癌細胞系
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