"THLE-3 cell line人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來(lái),1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng),此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時(shí),需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
THLE-3 cell line人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個(gè)培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無(wú)菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺(tái)臺(tái)面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開(kāi)超凈工作臺(tái)的紫外燈照射臺(tái)面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開(kāi)風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點(diǎn)燃酒精燈;取出無(wú)菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過(guò)酒精燈火焰略燒后插在無(wú)菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過(guò)酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個(gè)大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時(shí)立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對(duì)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長(zhǎng)滿
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過(guò)程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí),1~2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí),5~10℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí),可迅速放入液氮中。2.簡(jiǎn)易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過(guò)線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過(guò)夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。細(xì)胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細(xì)胞生長(zhǎng)液(92%血清)2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量?jī)龃嬉?,用吸管吹打制成?xì)胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml)。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱(chēng)和冷凍日期。液氮長(zhǎng)期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動(dòng)冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過(guò)3分鐘)。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對(duì)冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過(guò)離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含完全生長(zhǎng)培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
THLE-3 cell line人肝永生化細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-31細(xì)胞、Ls-174-T細(xì)胞、SkMel31細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
H-1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD15細(xì)胞、H-2135細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
KU-812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞
H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞、Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞
V-79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY 1細(xì)胞、C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、A204細(xì)胞
COLO206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞
HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞
THLE-3 cell line人肝永生化細(xì)胞系
624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞
K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu-1細(xì)胞、SVEC 4-10細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞
COLO-320-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞
293 H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC5細(xì)胞、NCI-H2291細(xì)胞、H-125細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
C166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞、NCI-H847細(xì)胞
T-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ML2細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞、BL-6細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
TE32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞
Karpas299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAN-G細(xì)胞、PL-11細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
HT-29/CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:231-luc細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞、HL60細(xì)胞
DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
SW-780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251 MG細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞、ID8細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
Mevo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
BE2-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細(xì)胞、U-2-OS細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞
NPA87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 145細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞
MRC-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞、HSC 3細(xì)胞、HO8910細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
Panc_05_04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細(xì)胞、H2172細(xì)胞、McARH7777細(xì)胞
Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞
HUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FK81細(xì)胞、HuT78細(xì)胞、OSK-1細(xì)胞
RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞
OLN-93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRA 01/04細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
HCC1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HA1800細(xì)胞、S-16細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞
THLE-3 cell line人肝永生化細(xì)胞系
A 72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC29細(xì)胞、SW-579細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞
HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1788細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞
HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、H820細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞
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