"THLE-3 Cell:人肝永生化細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
J-774A.1細胞系相關產品：CEM-CCRF細胞、OCI-Ly 19細胞、PC12(高分化)細胞
RM-1細胞系相關產品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關產品：H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
NL-20細胞系相關產品：RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
THLE-3 Cell:人肝永生化細胞系
細胞消化過程總結：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了，細胞之間的附著也已經消失了，細胞已經獨立分布了（雖然沒有呈現很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化３-５分鐘。１：２。３天內可長滿
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發(fā)生細胞數目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
GM03571細胞系相關產品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
B16 melanoma細胞系相關產品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
HLEB3細胞系相關產品：McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
H-650細胞系相關產品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
HPAF-I細胞系相關產品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
細胞生長特性：貼壁生長
THLE-3 Cell:人肝永生化細胞系
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數活細胞數，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
U-373 MG細胞系相關產品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
NCI-SNU-761細胞系相關產品：293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞
H-1688細胞系相關產品：MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
PL45細胞系相關產品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
SKRC20細胞系相關產品：C32 mel細胞、SV40-HCEC細胞、CCD-112CoN細胞
HR1K細胞系相關產品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
H-2108細胞系相關產品：HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
THLE-3 Cell:人肝永生化細胞系
H-2170細胞系相關產品：WILL-2細胞、Y-79細胞、RN-c細胞
KBM7細胞系相關產品：C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
NIH/3T3細胞系相關產品：MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞
HEK-293-H細胞系相關產品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
NBL-12細胞系相關產品：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
Meat Animal Research Center-145細胞系相關產品：Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞
SO-Rb 50細胞系相關產品：293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞
LS411細胞系相關產品：H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
UO31細胞系相關產品：MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
HCGC細胞系相關產品：BC3H-1細胞、PG-BE1細胞、OCUM-1細胞
UMC11細胞系相關產品：U-373-MG細胞、KRC/Y細胞、NTERA-2 cl.D1細胞
PC3細胞系相關產品：MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞
NCI-HUT-292細胞系相關產品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
NCI-H211細胞系相關產品：H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
NCI-H2330細胞系相關產品：SW 403細胞、NCI-H820細胞、MFC細胞
MH-22a細胞系相關產品：High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞
MDA-435細胞系相關產品：GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
H-660細胞系相關產品：P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
COV504細胞系相關產品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
V 79-4細胞系相關產品：FHs 74 Int細胞、K 562細胞、AU-565細胞
FHCRC-11細胞系相關產品：Metastatic Variant-522細胞、SupT1細胞、NCI-H2227細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關產品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
SUM 190細胞系相關產品：SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
MCF-7/ADR-RES細胞系相關產品：PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
LLCPK1細胞系相關產品：SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
HET1A細胞系相關產品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
EPC細胞系相關產品：M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞
NCI-SNU-C2B細胞系相關產品：X63-Ag8細胞、SUM 52細胞、GL261細胞
Line 697細胞系相關產品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
HEC-1-B細胞系相關產品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細胞系相關產品：SU-DHL-1細胞、Hep 3B2_1-7細胞、GM-215細胞
MODE-K細胞系相關產品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
KM12 SM細胞系相關產品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關產品：HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
NRK clone 52E細胞系相關產品：PBL細胞、ARO81細胞、NIH:OVCAR-5細胞
SK-MES-1細胞系相關產品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
LS-174細胞系相關產品：OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
HRA-19細胞系相關產品：NCI-H441細胞、aTC1-6細胞、HL 60細胞
SMMC-7721細胞系相關產品：CCD841CoN細胞、NCIH1651細胞、L Wnt-3A細胞
HCS-2/8細胞系相關產品：293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
SCC 15細胞系相關產品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
HR-8348細胞系相關產品：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
RMS 1598細胞系相關產品：PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
THLE-3 Cell:人肝永生化細胞系
hs 68細胞系相關產品：MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
MDA-MB-134細胞系相關產品：OVCA432細胞、Tu212細胞、624-mel細胞
Y3.AG.1.2.3細胞系相關產品：Rat Fetal Lung-6細胞、MES-SA/Dx5細胞、TALL 1細胞
Hce8693細胞系相關產品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
H-II-E-C3細胞系相關產品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
3-LL細胞系相關產品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
Hi5細胞系相關產品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
HDSMC細胞系相關產品：LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
Hela-mock細胞系相關產品：LS-123細胞、HCV 29細胞、Hs 578.Bst細胞
HA細胞系相關產品：HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
H1975細胞系相關產品：GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
Normal Rat Kidney-52E細胞系相關產品：U-138-MG細胞、SK-NMC細胞、UO-31細胞
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