"A7r5 fibroblast cells大鼠主動脈平滑肌細胞系
細胞背景資料：培養(yǎng)到穩(wěn)定期后細胞表現(xiàn)出長高的肌激酶和肌酸激酶活性(CPK)。 細胞分裂終止后合成骨肉型CPK。
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
S37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
細胞生長：貼壁
A7r5 fibroblast cells大鼠主動脈平滑肌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
MCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
A7r5 fibroblast cells大鼠主動脈平滑肌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
H-2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
A7r5 fibroblast cells大鼠主動脈平滑肌細胞系
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
Hep 3B2_1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞
D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
SUM159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
253J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞
PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
C17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
A 375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
NW-MEL-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
32D/cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
A7r5 fibroblast cells大鼠主動脈平滑肌細胞系
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細胞、MS-751細胞、LK2細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細胞、P30/0HK細胞、CAL 78細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
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