"PT-K75 fibroblast cells豬鼻甲黏膜成纖維細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
正確的細胞復(fù)蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
FRTL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-675-T細胞、P3X63Ag8.653細胞、SO-RB50細胞
Be Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB330細胞、LNCaP C4-2B細胞、IMR-32細胞
CORL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1299細胞、CF Pac1細胞、Hs746-T細胞
細胞生長：貼壁
PT-K75 fibroblast cells豬鼻甲黏膜成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞學(xué)在生命科學(xué)科中起著至關(guān)重要的作用，近年來細胞學(xué)蓬勃發(fā)展，并取得了重大的進展，細胞實驗室的構(gòu)建也是各個院校生物學(xué)科必備的實驗室。細胞實驗謹慎復(fù)雜，需要的實驗設(shè)備種類繁多，下面就一些動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹：CO２培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。純水系統(tǒng)：細胞培養(yǎng)用水一般要求雙蒸水，實際上普通蒸餾水經(jīng)玻璃器皿中按標準方法蒸餾二次得到的雙蒸水是不能滿足要求的，而且水中的內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡，血清中內(nèi)毒素含量越低，對細胞毒性越小，越利于細胞的生長和傳代;內(nèi)毒素含量過高，會直接導(dǎo)致細胞提前老化。因此建議配置正式的水純化系統(tǒng)。超凈工作臺/生物安全柜：細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高，在細胞操作時，一般需要在１００級空氣質(zhì)量條件下進行，因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。液氮罐：為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細胞可以保存十年具有活性。超低溫冰箱：細胞的凍存過程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時就必須配備一臺-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月，對于不需要長期凍存的細胞，可暫時放于超低溫冰箱保存。恒溫水浴：從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速復(fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。離心機：細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞，所以需要配置低速的常溫離心機，對于后期細胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機。移液器和細胞培養(yǎng)的大量耗材：細胞實驗中有大量頻繁的移液操作，因此各種微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各類細胞培養(yǎng)板、細胞培養(yǎng)瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量極大。除上述儀器外，高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞傳代方法：１：２傳代
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
PT-K75 fibroblast cells豬鼻甲黏膜成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞樣
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復(fù)蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
NP-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞
SUM 190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細胞、RIN-14B細胞、THC-8307細胞
H-1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-3細胞、MLMEC細胞、CPA47細胞
HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
PA317細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 2 C細胞、Panc04.03細胞、H3396細胞
IMR 90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-398細胞、SCLC-21H細胞、Sp2/mIL-6細胞
H69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-50細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PG [Human lung carcinoma]細胞
PT-K75 fibroblast cells豬鼻甲黏膜成纖維細胞系
SK-N-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 274.T細胞、IM-95細胞、SW 1271細胞
U266S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1細胞、NCI-H2198細胞、SNU-449細胞
C-Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
HCO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU368細胞、Wien 133細胞、SJSA-1細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
MiaPaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
AMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
P3X63NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細胞、RSC 96細胞、VP 267細胞
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
Mel-624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK81細胞、OCI-Ly8細胞、KYSE-30細胞
NCIH1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
U-373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
HEK293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞
OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
F-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
GP-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo7e細胞、NCI-522細胞、LCMS細胞
MKN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
RPMI-8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuperTube細胞、ABE8.1/2細胞、HDMEC細胞
GM02132C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細胞、GLC82細胞、MC57G細胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細胞、A9細胞、Rat-1細胞
CCD 841 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞
UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
MCFs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK (AD293)細胞、PG-4 S+L-細胞、Ramos.G6.C10細胞
SUDHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
Kasumi 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細胞、PC.3細胞、SK_N_FI細胞
K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
SW 982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Danio rerio Gill細胞、UWB1.289細胞、WERI-Rb 1細胞
MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
PT-K75 fibroblast cells豬鼻甲黏膜成纖維細胞系
138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細胞、CMT 167細胞、231-luc細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNEpC細胞、WM-2664細胞、Jeko1細胞
NCI-SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRMC細胞、UWB1-289細胞、JROECL 19細胞
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