"UMNSAH/DF-1 fibroblast cells雞胚胎成纖維細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
FLC-7細胞系相關產品：B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞
HTori 3細胞系相關產品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
CCD-18Co細胞系相關產品：TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
細胞生長：貼壁
UMNSAH/DF-1 fibroblast cells雞胚胎成纖維細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結凍時體積會增加約１０%，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質，應立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２傳代
AAV-293細胞系相關產品：P19細胞、A1847細胞、HECV細胞
NCI-H841細胞系相關產品：BNL.1ME A.7R.1細胞、NOZAWA細胞、Colo16細胞
EVSA/T細胞系相關產品：OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
NCI-H1882細胞系相關產品：HOPC細胞、SEM細胞、SKCO-1細胞
T-T細胞系相關產品：CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UMNSAH/DF-1 fibroblast cells雞胚胎成纖維細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：成纖維母細胞樣
造成實驗室細胞污染常見情況總結：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
NBL-4細胞系相關產品：UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
MTC-TT細胞系相關產品：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞
SW-1116細胞系相關產品：CL1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、MODE-K細胞
SUM149-PT細胞系相關產品：MHCC-LM3細胞、Vero E-6細胞、NOMO-1細胞
SuDHL 1細胞系相關產品：HSKMC細胞、BE2M17細胞、NCIH3255細胞
HPAF-2細胞系相關產品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
C12細胞系相關產品：DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
Central Adrenergic TH-expressing a細胞系相關產品：MPC-11細胞、H-128細胞、LAPC4細胞
Hs688(A)T細胞系相關產品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
PAEC細胞系相關產品：HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞
UMNSAH/DF-1 fibroblast cells雞胚胎成纖維細胞系
CAKI1細胞系相關產品：Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞
Y3-Ag123細胞系相關產品：C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
OCILY10細胞系相關產品：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
KCL22細胞系相關產品：GC9811-P細胞、EC-GI細胞、Hs27F細胞
RT-BM-1細胞系相關產品：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
T173細胞系相關產品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
T173細胞系相關產品：Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
HEC1-A細胞系相關產品：C33A細胞、hA549細胞、LAPC-4細胞
PATU-S細胞系相關產品：SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
hEM15A細胞系相關產品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
NCIH526細胞系相關產品：Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
V-79細胞系相關產品：NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
CEM-C1細胞系相關產品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關產品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
TCam 2細胞系相關產品：COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞
SW1990細胞系相關產品：SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
HCC1954細胞系相關產品：MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
C-127細胞系相關產品：McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關產品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
LY細胞系相關產品：H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
CEM/0細胞系相關產品：NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
MUS-M1細胞系相關產品：KE-37細胞、PCI-4M細胞、BNCL2細胞
HUV-EC-C細胞系相關產品：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞
HME1細胞系相關產品：MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞
D 407細胞系相關產品：HCT 15細胞、293 HEK細胞、ECC12細胞
Tu177細胞系相關產品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
IM9細胞系相關產品：Chang Cells細胞、W256細胞、FTC133細胞
D6P2T細胞系相關產品：HFL1細胞、SAS細胞、Hs 675.T細胞
HuH-28細胞系相關產品：MCCAR細胞、Hs934T細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞
PY8119細胞系相關產品：Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產品：MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
CLL-CII細胞系相關產品：SW13細胞、H-441細胞、D341Med細胞
Human fetal lung fibroblast 1細胞系相關產品：OCI AML3細胞、LC-1 sq細胞、WM239細胞
SF-295細胞系相關產品：HSMC細胞、SUM-149PT細胞、Ly8細胞
Huh-7.5細胞系相關產品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
MCM細胞系相關產品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
Bovine ENDometrial cells細胞系相關產品：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
VM-CUB-1細胞系相關產品：BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
BC-028細胞系相關產品：FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
PVEC細胞系相關產品：L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞
UMRC-2細胞系相關產品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
HeLa S-3細胞系相關產品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
C643細胞系相關產品：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞
NCIH1963細胞系相關產品：C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
NCI-SNU-668細胞系相關產品：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞
GP2d細胞系相關產品：CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
H-1876細胞系相關產品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
Fetal Bovine Heart Endothelial細胞系相關產品：HT22細胞、U 266細胞、PLCPRF5細胞
SW 756細胞系相關產品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
CEM-C1細胞系相關產品：Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞
H3255_DA細胞系相關產品：HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
UMNSAH/DF-1 fibroblast cells雞胚胎成纖維細胞系
N87細胞系相關產品：HDSMC細胞、Th17細胞、L-M(TK-)細胞
CL 1-5細胞系相關產品：PANC-1細胞、HLCL9B10細胞、NCI.H23細胞
MDAMB157細胞系相關產品：MRC-V細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-187細胞
SW-1116細胞系相關產品：CL1細胞、NCIH2066細胞、CF Pac1細胞
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