"SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
VMM5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX-1細胞、Fox/NY細胞、7860細胞
MCF.10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP-3B2細胞、P1-Raji細胞、F442A細胞
VM-CUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
細胞生長:貼壁
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
HCT/Taxo1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2-D1細胞、RKN細胞、NW-MEL-38細胞
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
CV-1.K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVMANA細胞、Ku812F細胞、RH8994細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞
Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞
SU86.86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細胞、BIC細胞、H-1435細胞
HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
RT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
HCC1500細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC33細胞、HTR-8/SV neo細胞、H1417細胞
NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
LAD2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-1細胞、RGB細胞、WERIRb1細胞
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細胞系
NCIH510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞
HuH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
OCI-Ly01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
NHEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
NHEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 435細胞、526 mel細胞、OCI-Ly 18細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
H-748細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
Panc-1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細胞、ABC-1細胞、RS4-11細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H187細胞、SW 1783細胞、H1930細胞
IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
NCI-H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
GM15452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞、COLO 320細胞
P3-X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 2185細胞、Reuber H35細胞、H460細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
NCI-H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
FLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs68細胞、PC10細胞、SNU484細胞
GI-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-10細胞、SW-1088細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞
KYSE0410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞
Institute for Medical Research-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CACO2細胞、NCIH2009細胞、NCI-H322T細胞
F98細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-CAR細胞、YES 2細胞、YAC-1細胞
Hs 934.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4-11細胞、NCIH2030細胞、G 401細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞
KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
SNU407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL6細胞、SNU251細胞、OVCAR.4細胞
NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞
NCIH1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
SW13 epithelioid cells人腎上腺皮質(zhì)瘤細胞系
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細胞、H1648細胞、KLN205細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-IIIa細胞、NCI H157細胞、SCC-15細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、J-774A.1細胞、SNU-520細胞
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