"Y1 epithelioid cells小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。 SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOS細(xì)胞、Panc-03.27細(xì)胞、HEC1-A細(xì)胞 EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 Y1 epithelioid cells小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 T-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞 Hs688(A)T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266-4細(xì)胞、mousepodocyte細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞 NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞 HEK;293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954 BL細(xì)胞、B16/F1細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞 F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO 175.T細(xì)胞、H23細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Y1 epithelioid cells小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 HT-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC 70細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞 H35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 2008細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞 KP-N-RT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1563細(xì)胞、Ca-Ski細(xì)胞、HG2855細(xì)胞 PAI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC090細(xì)胞、MS751細(xì)胞、H1404細(xì)胞 Hs281T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細(xì)胞、T9細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞 BpRc1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME1細(xì)胞、H1048細(xì)胞、IM-9細(xì)胞 OE33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞 FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞 LN 229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMVEC細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞 KG1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-26細(xì)胞、UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、Anip973細(xì)胞 Y1 epithelioid cells小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系 HEK293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞 CLONE M3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細(xì)胞、A3細(xì)胞、HPAF-II細(xì)胞 J 111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞、L929細(xì)胞 H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞 Balb/c3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細(xì)胞、DLM8細(xì)胞、BL6細(xì)胞 Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞 Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1588細(xì)胞、MPC5細(xì)胞、SW-527細(xì)胞 MGC-803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMC-G1細(xì)胞、Leukemic 1210細(xì)胞、SKMEL-24細(xì)胞 HUT 226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞 SW 756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G422細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞、CCD 966SK細(xì)胞 HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞 L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞 G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞 EO771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH841細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞、Hs 852.T細(xì)胞 293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞 Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞 NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞 HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞 HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞 HSKMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞、SIRC細(xì)胞 H-1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞 WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞 Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞 HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞 HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞 SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞 MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞 KYSE180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-Olig2細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞 CTV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞、NEC細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞 RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞 MV 4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細(xì)胞、CV-1.K細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞 SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞 NIE 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞、NCIH1395細(xì)胞 SF295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細(xì)胞、Lu-165細(xì)胞、PK136細(xì)胞 U-118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP4細(xì)胞、Hs611T細(xì)胞、NB-9細(xì)胞 Hs888T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4 I細(xì)胞、LPC-H12細(xì)胞、GOS3細(xì)胞 NCIH510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-9細(xì)胞、HCT GEO細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞 A 2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2C細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞 Hs 870.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、KYSE510細(xì)胞 TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞 He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞 GM07404A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞 Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞 HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞 SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞 LN-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:W256細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞、U-266細(xì)胞 OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞 Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞 SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞 Y1 epithelioid cells小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞系 SK-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK 2細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞 C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細(xì)胞、Kuramochi細(xì)胞、SNU668細(xì)胞 FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、TR-146細(xì)胞、SW1088細(xì)胞 KP-N-RT-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞 "
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