"ACHN Thawing人腎細胞腺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９７９年建系，源自一名２２歲患有腎細胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細胞的生長，該細胞多用于干擾素及其誘導(dǎo)劑的抗增殖研究。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
ACHN Thawing人腎細胞腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細胞時，發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們該怎么進行解決？以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細胞死亡，因此細胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期；４)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長，存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應(yīng)處于對數(shù)期。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周２-３次。
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
ACHN Thawing人腎細胞腺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
GM03190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1092細胞、H69細胞、WiDr/S細胞
ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞
KPL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2219C細胞、WC00044細胞、Hs 940.T細胞
MCF12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST50細胞、NCI-SNU-C2B細胞、GC-2細胞
NCI-H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
H22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 70細胞、Y3Ag1.2.3細胞、Glioma 261細胞
MDA-MB-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
CCD-841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
UCLA RO-81-A-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 EBNA細胞、Molm 13細胞、SUDHL8細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
MDAMB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT1080細胞、BC-023細胞、IM9細胞
C166細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、N1E-115細胞、Malme3M細胞
EoL-1-cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL細胞、Beta-TC-6細胞、MNNGHOS細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
NMCG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
INS1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1B細胞、KTCTL140細胞、HEK 293T/17細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
UMUC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388D1細胞、Psi-2 DAP細胞、MOLT 16細胞
HT22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos細胞、Kato-III細胞、MDA-MB453細胞
SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1648細胞、H-460細胞、TE-3A細胞
ACHN Thawing人腎細胞腺癌細胞系
HME-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACT-1細胞、GM02219C細胞、MIHA細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
NCI-SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細胞、HeLa S3細胞、PC-9/GR細胞
SHSY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1666細胞、MEF細胞、FL-83B細胞
H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8402細胞、TE-10細胞、HEK 293細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
Hs-695-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H226細胞、JB6 Cl 30細胞、OVCA-420細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
MESSA/Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12-SM細胞、HLEC-B3細胞、MEG01細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
RPMI #8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：He La細胞、LICR-LON-HN6-R細胞、SKNBE-2細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
HCC1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
Hmy.2 CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細胞、NE1細胞、KYSE 450細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
MDA-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5細胞、KY180細胞、M4e細胞
BMSCs（mBMSCs）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2OS細胞、Cloudman S91 melanoma細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞
UCLA-RO 81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-14細胞、HTori:3細胞、MDA.MB.231細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
MCF-7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6.1細胞、TFK-1細胞、NCIH1703細胞
C-Li-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-780細胞、SJSA1細胞、KU 812F細胞
H 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、BE(2)C細胞、P3/NS1/1-Ag4.1細胞
SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
ACHN Thawing人腎細胞腺癌細胞系
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
MRC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-1細胞、DSL6A/C1細胞、PCI-4B細胞
MV4II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
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