"ACHN Cell:人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞1979年建系,源自一名22歲患有腎細(xì)胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細(xì)胞的生長(zhǎng),該細(xì)胞多用于干擾素及其誘導(dǎo)劑的抗增殖研究。
HCV29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細(xì)胞、HCC-1171細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞
H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞
IHC-ST1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細(xì)胞、H-3255細(xì)胞、HPC-Y5細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ACHN Cell:人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代,每周2-3次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞
MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
ACHN Cell:人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
C-4-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細(xì)胞、beta-TC6細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞
ESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞
JKT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞、HCC0366細(xì)胞
Mel526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細(xì)胞、KCL-22細(xì)胞、KRC/Y細(xì)胞
H-1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞、AML-193細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
ACHN Cell:人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
32Dcl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞、WPMY-1細(xì)胞
SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞
OVCAR 433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO394細(xì)胞、SMMC7721細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞
NCIH226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細(xì)胞、LTPA細(xì)胞、COLO320DM細(xì)胞
hESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCAP37細(xì)胞、TE12細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞
SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
HuCC-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞、H-209細(xì)胞
Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞
HEL9217細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kato-III細(xì)胞、H1836細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
Mink細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
Leydig細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞
190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細(xì)胞、OCM1A細(xì)胞、Calu 3細(xì)胞
PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞
Hs600T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞、U20-S細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
A2780-CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.T細(xì)胞、NG10815細(xì)胞、KM-H2細(xì)胞
ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞
PA-TU S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細(xì)胞、IMR 32細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞
RPMI-8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
Metastatic Variant 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細(xì)胞、MV3細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞
MAVER細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞
OCI AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細(xì)胞、H-1770細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細(xì)胞、MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-69細(xì)胞、WI38細(xì)胞、H-292細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
Sp 2817細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞
LC1-Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞
JB6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞
AZ 521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細(xì)胞、H1651細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞
MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞
MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞
S.B.細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7402細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞、DU 145細(xì)胞
HPAEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞
ACHN Cell:人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞
MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-357細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞、FRhK4細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞
LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞
22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、RM-1細(xì)胞
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關(guān)鍵字: ACHN Cell:人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系
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