"GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長：貼壁
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅。或者在培養(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰毎麅?nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
P3/X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞
CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU 1細胞、MARC-145細胞、HCC0827細胞
NCI-H727細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL 1細胞、NCI-H1993細胞、KG-1細胞
SCC-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2052細胞、COLO 320 DM細胞、SNG-M細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
SNT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細胞、OCI-LY-10細胞、HP615細胞
U-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-WRC 256細胞、TE-12細胞、McArdle RH-7777細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
MIA-Pa-Ca-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：451-LU細胞、JEG-3細胞、Panc 08.13細胞
HH [Human lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1184細胞、H-1882細胞、C2A細胞
NALM-6-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-15細胞、KRCY細胞、LAD 2細胞
Molm 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2-cloneD1細胞、PNT1/A細胞、SK-NSH細胞
DMS-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細胞、AM38細胞、UMUC1細胞
NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細胞、IB-RS2細胞、KMM-1細胞
U138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ-1細胞、OCI-Ly10細胞、H1755細胞
OV1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細胞、SK-ChA-1細胞、UPCI:SCC154細胞
HuH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-120細胞、MeT 5A細胞、M 1細胞
COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞
PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
U-373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
U-373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
RT-BM 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95.8細胞、SK MEL-28細胞、CemT4細胞
SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2細胞、32Dc3細胞、MRMT-1細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
RA-FLSs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0044細胞、ZR75-30細胞、L6細胞
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細胞系
WB F344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細胞、LS-174T細胞、RPMI8226/S細胞
Mel624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH847細胞、CAL 148細胞、SK Mel 24細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
MDA MB 436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細胞、EAC-E2G8細胞、KM12-SM細胞
QG-56細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SY5Y細胞、Tu-686細胞、SB細胞
HSC-T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞
Tu177細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細胞、Mhh-Call 2細胞、HPDE細胞
Madin-Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-251細胞、CCC-HEL-1細胞、RERF-LC-MS細胞
HS-940-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940-T細胞、WILL-2細胞、HSF2細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：95D細胞、Hs 940.T細胞、UACC812細胞
NCI/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM-88細胞、DC 2.4細胞、L-cell細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
526mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞
NOZAWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
GM-637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞
C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
SGC-7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細胞、NK-92細胞、V-79-4細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞
GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
OVCAR.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
HPAF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞
WEHI164細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞
GAK Thawing人類惡性黑色素瘤細胞系
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
Hela-Ap-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-2/ad細胞、HSKMC細胞、MKN1細胞
32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞
RCC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
NCIH1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
PANC 203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
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