"HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：每３-４天換液
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出舊培養(yǎng)液，用PBS清洗(沖洗)，加入適量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以蓋住細(xì)胞，消化溫度是３７℃；２)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時細(xì)胞消化適度；(３)吸棄消化液加入培養(yǎng)液：棄去胰蛋白酶液，注意更換吸管，加入新鮮的培養(yǎng)液?！敬荡蚍稚⒓?xì)胞操作】１)吹打制懸：用滴管將已經(jīng)消化細(xì)胞吹打成細(xì)胞懸液；２)吸細(xì)胞懸液入離心管：將細(xì)胞懸液吸入１０ml離心管中；３)平衡離心：平衡后將離心管放入臺式離心機(jī)中，以１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心６-８分鐘；４)棄上清液，加入新培養(yǎng)液：棄去上清液，加入２ml培養(yǎng)液，用滴管輕輕吹打細(xì)胞制成細(xì)胞懸液?！痉盅b稀釋細(xì)胞操作】１)顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞量，必要是計(jì)數(shù)。注意密度過小會影響傳代細(xì)胞的生長，傳代細(xì)胞的密度應(yīng)該不低于５×１０５/ml。最后要做好標(biāo)記；２)分裝：將細(xì)胞懸液吸出分裝至２～３個培養(yǎng)瓶中，加入適量培養(yǎng)基旋緊瓶蓋；３)繼續(xù)培養(yǎng)：用酒精棉球擦拭培養(yǎng)瓶，適當(dāng)旋松瓶蓋，放入CO２培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。傳代細(xì)胞２小時后開始貼附在瓶壁上。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
HCPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-67細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞
U266B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細(xì)胞、EO771細(xì)胞、OV1063細(xì)胞
SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞
KMM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞
CMECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細(xì)胞、JHH2細(xì)胞、mREC細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
VMRCLCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-5178-Y-R細(xì)胞、PaTu-8988s細(xì)胞、Astrocyte type I clone細(xì)胞
A2780S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細(xì)胞、3T3 clone A31細(xì)胞、WSU-DLCL2細(xì)胞
KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細(xì)胞、H-64細(xì)胞、MRC5細(xì)胞
SKCO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞
FRTL-5 Cl 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8.653細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞
ECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S91細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞、H1954細(xì)胞
MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細(xì)胞、HCGC細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞
AG06814-J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細(xì)胞、Pt K2細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
MN60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-679細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞、WISH細(xì)胞
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-07e細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞
OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細(xì)胞、Lieming Xu-2細(xì)胞、VSC4.1細(xì)胞
EJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa-RG細(xì)胞、SNT8細(xì)胞、CORL105細(xì)胞
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細(xì)胞、PK-13細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞
DMS79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-1細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞
WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
HBE 135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞
PF-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-102細(xì)胞、Hs888 Lu細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞
LA4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細(xì)胞、NCI-H810細(xì)胞、Hs 578.T細(xì)胞
HOC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2073細(xì)胞、293S細(xì)胞、H1648細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
EAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-373 MG細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞、Swiss-3T3細(xì)胞
CSQT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Blotchy fibroblast-11細(xì)胞、COR-L88細(xì)胞、BT-474細(xì)胞
Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1755細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
MV411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC7細(xì)胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、PFSK細(xì)胞
MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
HRIF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MCF-10A細(xì)胞
B16/BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細(xì)胞、Huh-7.5細(xì)胞、RWPE2細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞
HCC1599 Thawing人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
BT325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY細(xì)胞、J82細(xì)胞、HuH7細(xì)胞
AML193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細(xì)胞、MOLP2細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞
LU451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J82 COT細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞
Panc327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-1細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞、COLO-320HSR細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
NMCG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVSMC細(xì)胞、SaOS-2細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
TI-73細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B2.1-7細(xì)胞、KS-SLK細(xì)胞、P3J.HR1K細(xì)胞
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