"HCC1500 Thawing人乳腺導管癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HCC1500 Thawing人乳腺導管癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每３-５天換液
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC1500 Thawing人乳腺導管癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
NCIH64細胞系相關產(chǎn)品：Colo-201細胞、HL-1細胞、HOP62細胞
PK15細胞系相關產(chǎn)品：WM 2664細胞、HEC151細胞、Mel RM細胞
HRA19細胞系相關產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
GM03569D細胞系相關產(chǎn)品：MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞
UO-31細胞系相關產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
HL60細胞系相關產(chǎn)品：MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
MDCK supertube細胞系相關產(chǎn)品：MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
HFT8810細胞系相關產(chǎn)品：MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
Michigan Cancer Foundation-12A細胞系相關產(chǎn)品：NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞
SW 780細胞系相關產(chǎn)品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
Ramos 1細胞系相關產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細胞、SK-N-BE-2c細胞、Sc-1細胞
293E細胞系相關產(chǎn)品：INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞
MG-HU-3細胞系相關產(chǎn)品：TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
253J細胞系相關產(chǎn)品：GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞
HCASMC細胞系相關產(chǎn)品：NR-8383細胞、NCIH1355細胞、SF 126細胞
HEH2細胞系相關產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、T84細胞、SCL2細胞
H-2591細胞系相關產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
NCI-H2141細胞系相關產(chǎn)品：KTA-7細胞、Ca9-22細胞、BIC-1細胞
PIG1細胞系相關產(chǎn)品：L78細胞、FTC133細胞、SKMEL24細胞
MDA1386細胞系相關產(chǎn)品：BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
NCI-H1563細胞系相關產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
NCI-H1563細胞系相關產(chǎn)品：HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞
Mino細胞系相關產(chǎn)品：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
SNU398細胞系相關產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
KM933細胞系相關產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞
Mhh-Call 2細胞系相關產(chǎn)品：GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞
HCC1500 Thawing人乳腺導管癌細胞系
SW 756細胞系相關產(chǎn)品：G422細胞、RBL-1細胞、CCD 966SK細胞
CNE細胞系相關產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
HuH1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H747細胞、Wien133細胞、AKR細胞
HEL-1細胞系相關產(chǎn)品：SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞
NCI-H1404細胞系相關產(chǎn)品：THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
NCI-SNU-878細胞系相關產(chǎn)品：VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
JROECL 21細胞系相關產(chǎn)品：KATOIII細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、MeT5A細胞
U937細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
HSC6細胞系相關產(chǎn)品：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
BCAP37細胞系相關產(chǎn)品：HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關產(chǎn)品：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
THPI細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
U118-MG細胞系相關產(chǎn)品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
Hs274T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
M07e細胞系相關產(chǎn)品：BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關產(chǎn)品：OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
McCoy B細胞系相關產(chǎn)品：SNU16細胞、NCIH1373細胞、BEL-7405細胞
A875細胞系相關產(chǎn)品：SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
H-35 Reuber細胞系相關產(chǎn)品：COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
LuCL4細胞系相關產(chǎn)品：CD 18細胞、BC-025細胞、Baby Hamster Kidney 21細胞
SU-86-86細胞系相關產(chǎn)品：HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
HDLM2細胞系相關產(chǎn)品：HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
MV411細胞系相關產(chǎn)品：SCC7細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、PFSK細胞
LS-174T細胞系相關產(chǎn)品：H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
HMEC-1細胞系相關產(chǎn)品：LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
SNU-387細胞系相關產(chǎn)品：H-1395細胞、NCIH1105細胞、UMNSAH/DF#1細胞
SBC-5細胞系相關產(chǎn)品：SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
JeKo 1細胞系相關產(chǎn)品：HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
Caco-2 BBe細胞系相關產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
NCI-H2081細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
210RCY3-Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細胞、QSG-7701細胞、NCIH650細胞
MDCKII細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
OKT3細胞系相關產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
HCC1500 Thawing人乳腺導管癌細胞系
F442-A細胞系相關產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
Hs 695.T細胞系相關產(chǎn)品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
Rin-M-5F細胞系相關產(chǎn)品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
DH-82細胞系相關產(chǎn)品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
OCI-Ly03細胞系相關產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
CP-70細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞
LC-1/sq細胞系相關產(chǎn)品：Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
NCI-HUT-69細胞系相關產(chǎn)品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
MDA MB 134VI細胞系相關產(chǎn)品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
C42細胞系相關產(chǎn)品：LUDLU-1細胞、1E8-H細胞、PLA 802細胞
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