"RTE Thawing大鼠氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
RTE Thawing大鼠氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞,說一點(diǎn)自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法:1)培養(yǎng)細(xì)胞前,可以看看細(xì)胞特點(diǎn)說明書,包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等;2)不同細(xì)胞生長周期不同,有的生長很快,比如說MDA-MB-231,傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了,有的又是特別慢,等的人心焦,BT474就是,傳代是一分二,復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長滿,所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了;3)對于嬌弱的細(xì)胞,就得細(xì)心呵護(hù)了,胰酶消化不能過久,吹得時(shí)候要輕柔,離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間,每天都要去看一下細(xì)胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況;4)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基;5)培養(yǎng)箱隔一段時(shí)間徹底用酒精棉擦洗一次;6)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn):不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍,我待細(xì)胞如初戀。1)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞,剛拿到手趕緊做兩件事:檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存;2)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉,特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí); 細(xì)菌污染,真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細(xì)胞會長的慢,買個(gè)支原體檢測的kit定期檢測一下;3)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的,此外還要定期熏蒸;4)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律,保持相同的confluency和傳代時(shí)間間隔,不要隨心所欲或者拖延;5)注意個(gè)人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次
傳代的操作步驟注意事項(xiàng):1)操作前要洗手,進(jìn)入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈,操作在火焰附近進(jìn)行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時(shí)間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準(zhǔn)確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機(jī)會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí),動作要輕,以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟:1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RTE Thawing大鼠氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖,凋亡,遷移,分化之類的),受消化影響不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn),比如病毒包裝,對細(xì)胞代數(shù),對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候,胰酶消化,就是潤洗,都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響,傳代次數(shù)一多,細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化,用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性,來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。許多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白,trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA,就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長消化時(shí)間(如果10min還消化不徹底的話),而應(yīng)該想其它辦法;PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講,對于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性:多角
DHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞
Mono Mac6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:138 MG細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞、SCC-9細(xì)胞
HuH 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC812細(xì)胞、OE19細(xì)胞、NCI-SNU-601細(xì)胞
MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
GT1-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞、2B4細(xì)胞
CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞
KHYG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細(xì)胞、GM00346細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
BT-483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8161細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞、U-87-MG細(xì)胞
CORL51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1299細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞
H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞
SHSY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666細(xì)胞、MEF細(xì)胞、FL-83B細(xì)胞
MDA-PCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細(xì)胞、HSC細(xì)胞、NCI-H1373細(xì)胞
NCIH64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-201細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞
H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE1細(xì)胞、L cell細(xì)胞、LY細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞
Ls-174-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H87細(xì)胞、MC-CAR細(xì)胞、RMS13細(xì)胞
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
HEK293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7951細(xì)胞、H920細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞
Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞
Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞
RTE Thawing大鼠氣管上皮細(xì)胞系
Hs729細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 08.13細(xì)胞、HONE1細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞
Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
NCI-H1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-520細(xì)胞、MESSA細(xì)胞、H-748細(xì)胞
J774A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676細(xì)胞、OVCAR 432細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞
P3 (Jiyoye)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hMSC-BM細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞、B-95-8細(xì)胞
Hs 888Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6 4C10細(xì)胞、KP2細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞
TM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞、746T細(xì)胞
KYSE-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-453細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞、BV-2細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細(xì)胞、NBL-4細(xì)胞、NS20Y細(xì)胞
CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞
NCI-H1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細(xì)胞、OKAC1細(xì)胞、NCI-H441細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
SNUC2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 549細(xì)胞、Panc_02_03細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞
8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
JCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-Hut 125細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞、H-64細(xì)胞
HuH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H747細(xì)胞、Wien133細(xì)胞、AKR細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
A-1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-29細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞
HEK293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-2細(xì)胞、P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、SupT1細(xì)胞
H-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-F細(xì)胞、HTR8/SVneo細(xì)胞、H-1703細(xì)胞
SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
SKNBE(2c)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Melan-a細(xì)胞、HCA 7細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC VII細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞、MONO-MAC 6細(xì)胞
253J B-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、HEC-1A細(xì)胞、H838細(xì)胞
ROS17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞
NCI-H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細(xì)胞、Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞
RTE Thawing大鼠氣管上皮細(xì)胞系
IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞
CoCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞、J774A.1細(xì)胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞
P3J HR1-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-101D細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞
Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
NCIH2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-62細(xì)胞、hTERT-HME-1細(xì)胞、SUDHL10細(xì)胞
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
MEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 111細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞、SK Col 1細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
MGH-UI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASH3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞
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