"RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 H19-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞、SCL-II細(xì)胞 ROS 17/2.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞、UMNSAH-DF 1細(xì)胞 NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前,細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存:計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細(xì)胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以1×10(7)到5×10(7)細(xì)胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無(wú)血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存:使用分離試劑從基層分離細(xì)胞,分離時(shí)盡可能溫和,使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細(xì)胞,確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細(xì)胞。以5×10(6)到1×10(6)細(xì)胞/ml密度,在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以1℃/分鐘進(jìn)行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細(xì)胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次 Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM3細(xì)胞、SGC7901/DDP細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞 NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞 H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞 ANA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-127細(xì)胞、KBM7細(xì)胞、H-2081細(xì)胞 S91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:多角 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞 SW 1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細(xì)胞、T. T細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞 NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細(xì)胞、HITT15細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞 NCIH1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細(xì)胞、WRL68細(xì)胞、HCC-827細(xì)胞 COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞 Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞 P3JHR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞 SK-MEL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細(xì)胞、Mel624細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞 RC-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細(xì)胞、MDA468細(xì)胞、MonoMac1細(xì)胞 L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細(xì)胞系 Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞 MDA-PCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞 GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞 U138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細(xì)胞、ST-2細(xì)胞、BIU87細(xì)胞 PLC/PRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞 BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞 NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞 SP2/0 Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細(xì)胞、KTA7細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞 SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞 NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細(xì)胞、WI 38細(xì)胞、Tb 1-Lu細(xì)胞 M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞 SP-2/0-AG14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細(xì)胞、MN60細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞 HSC(Human Schwann)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細(xì)胞、SupB15W細(xì)胞、GM17219細(xì)胞 NCI-H1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細(xì)胞、RA細(xì)胞、NCI-H596細(xì)胞 McCoy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細(xì)胞、HAVSMC細(xì)胞、CA-46細(xì)胞 UMR106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細(xì)胞、Panc203細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞 P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞 HPAF II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞 HCoEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞 SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞 BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞 L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細(xì)胞、DU-4475細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞 SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞 QSG-7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、RPTC細(xì)胞 NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞 SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞 EFM-192A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H524細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞、Mv1Lu細(xì)胞 C17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-453細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞、Tn5B1-4細(xì)胞 BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞 HFL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞 U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞 PNEC30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細(xì)胞、FHC細(xì)胞、BCPAP細(xì)胞 DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞 B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細(xì)胞、NCI-H1688細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞 OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞 H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞 U343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-Jurkat細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞 SW 626細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細(xì)胞、HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、159 PT細(xì)胞 U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞 Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞 EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞 CATH.a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞、SUP-M2細(xì)胞 SUDHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX-1細(xì)胞、NCI-H929細(xì)胞、SKml2細(xì)胞 LNCaP-C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6細(xì)胞、QGY細(xì)胞、HT29細(xì)胞 CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞 Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞 Walker/LLC-WRC256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞 IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞 Hs606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞 H.Ep. No. 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細(xì)胞、Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、OVCAR8/ADR細(xì)胞 OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細(xì)胞系 SW 954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細(xì)胞、Mel526細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞 VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞 B16 melanoma F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、SK-Col-1細(xì)胞 NCl-H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、SUIT2細(xì)胞 "
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