"RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 H19-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM07404細胞、OCI AML2細胞、SCL-II細胞 ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞 NCI-H128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細胞、YTMLC-90細胞、GM03573A細胞 細胞生長:貼壁 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次 Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞 NCI-H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞 H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞 ANA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-127細胞、KBM7細胞、H-2081細胞 S91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192細胞、Walker-256細胞、MDAMB134細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:多角 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞 SW 1222細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2029細胞、T. T細胞、CAL 51細胞 NCl-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細胞、HITT15細胞、MDA-134細胞 NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞 COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞 Hs294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞 P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞 SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞 RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞 L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細胞系 Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞 MDA-PCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞 GC-1 spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H3255細胞、CHL-CL-11細胞、NMC-G1細胞 U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞 PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞 BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞 NHRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞 SP2/0 Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cloudman S91 melanoma細胞、KTA7細胞、Psi-2-DAP細胞 SO-Rb 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞 NuTu-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-B15細胞、WI 38細胞、Tb 1-Lu細胞 M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞 SP-2/0-AG14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD2細胞、MN60細胞、KP-N-NS細胞 HSC(Human Schwann)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HHM-2細胞、SupB15W細胞、GM17219細胞 NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞 McCoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞 UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞 P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞 HPAF II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、Caki-1細胞、NUGC2細胞 HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P36細胞、C8D1A細胞、HONE-1細胞 SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞 BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞 L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞 SNU1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞 QSG-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 626細胞、Y3-Ag1.2.3細胞、RPTC細胞 NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞 SK.OV.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞 EFM-192A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H524細胞、Anip 973細胞、Mv1Lu細胞 C17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞 BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞 HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞 U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞 PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞 DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞 B35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-3細胞、NCI-H1688細胞、MeT-5A細胞 OVCAR-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞 H2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞 U343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞 SW 626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1/sq細胞、HK-2 [Human kidney]細胞、159 PT細胞 U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞 Saos2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞 EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞 CATH.a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC 12細胞、NCIADRRES細胞、SUP-M2細胞 SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞 LNCaP-C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6細胞、QGY細胞、HT29細胞 CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞 Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞 Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞 IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞 Hs606細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH7細胞、HDMEC細胞、Panc 8.13細胞 H.Ep. No. 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 2H3細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞、OVCAR8/ADR細胞 OPM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細胞、OVCAR-420細胞、MSC細胞 RTE epithelioid cells大鼠氣管上皮細胞系 SW 954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞 VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、CWR-22rv1細胞、HOMEC細胞 B16 melanoma F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細胞、As-PC1細胞、SK-Col-1細胞 NCl-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-027細胞、OCILY-3細胞、SUIT2細胞 "
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