"KLE Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞背景資料：該細胞源自６４歲子宮內(nèi)膜癌女性患者
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
KLE Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長：貼壁
體內(nèi)細胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液；３)培養(yǎng)細胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計數(shù)并調(diào)整細胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細胞)。初次接種成功率低，細胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?！靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時，腹水常呈血性(含大量紅細胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌，進行細胞計數(shù)；２)消毒動物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細胞；３)接種腹水瘤細胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代，３-４天換液一次
傳代的操作步驟注意事項：1)操作前要洗手，進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后，把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟：1)吸出細胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KLE Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
RGCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細胞、C81-61細胞、3T6 Swiss Albino細胞
TCMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT.64細胞、OCI Ly1細胞、H-23細胞
DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KASUMI6細胞、C22細胞、LM(TK-)細胞
UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3細胞、MC57細胞、NBL-5細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
OCI-Ly 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC 18細胞、HLE B-3細胞、WILL-2細胞
HFF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAEC細胞、HuH 6細胞、P3.653細胞
FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
AMC-HN8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細胞、PaTu 8988s細胞、NCI-841細胞
Daoy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB-17細胞、NTera2 cl.D1細胞、SW 962細胞
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
NCI-H2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞
NCI-H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8.653細胞、HS-940-T細胞、MCMEC細胞
NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
H-2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3細胞、A549細胞、CCRF CEM細胞
MC3T3-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
NCI-H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Institute for Medical Research-32細胞、SK-OV-433細胞、VMM-5A細胞
LIM-1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0327細胞、CEMx721.174.T2細胞、GM00637F細胞
KLE Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
MFE 296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細胞、RPMI-7666細胞、NCI-SNU-1040細胞
MT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294-T細胞、BIU87細胞、DMS273細胞
NCI-H1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP FGC細胞、V79細胞、H2087細胞
TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
HCCC-9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
Hs 888.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPDC-CCL141細胞、LC-MS細胞、TCC-PAN2細胞
H-1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞
VMCUB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細胞、NB1RGB細胞、NOR10細胞
NCIADR.RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE 1細胞、SU-DHL-5細胞、3LL細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
SUP-M2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1271細胞、D283MED細胞、Baby Hamster Kidney-21細胞
TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
SKMel-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細胞、Hepatoma-22細胞、HL-1細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
Leukemia L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
HCC-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細胞、P3-X63Ag8細胞、EST50細胞
CHL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373 MG細胞、Chang Cells細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞
BT-483細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8161細胞、JROECL33細胞、U-87-MG細胞
SK-N-BE(1)n細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞
HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
K562/ADP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH-30細胞、TE-85 clone 5細胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞
ABC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-852-T細胞、Sci-1細胞、R1800[RA]細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
KLE Thawing人子宮內(nèi)膜癌細胞系
Nthy-ori 3-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 636 T細胞、LYR細胞、L 929細胞
RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
JB6 Cl 30-7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞
451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NEP-1細胞、H-1792細胞、RIN-14B細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
SUPT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
H-1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-42細胞、CAL-78細胞、Hs 766.T細胞
SUDHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
SNG-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
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