"HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細胞系
細胞背景資料：該細胞屬源于正常腎的近曲小管細胞，通過導入HPV-１６ E６/E７基因而獲得永生化。將含有HPV-１６ E６/E７基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN １６ E６/E７轉(zhuǎn)染外生包裝細胞Psi-２，Psi-２細胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細胞系PA３１７，最后將PA３１７產(chǎn)生的病毒顆粒導入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細胞。盡管pLXSN １６ E６/E７中含有新霉素抗性，但未用G４１８篩選轉(zhuǎn)導克隆。Southern和FISH分析顯示HK-２細胞來源于單克隆。PCR檢測證實HK-２細胞基因組中含有E６/E７基因。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細胞系
細胞生長：貼壁
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預熱的培養(yǎng)基中；２)不適當?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：４傳代；２-３天換液１次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細胞生長角度來說，針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因：細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多，細胞老化；2)細胞的接種量：接種量過低，細胞生長緩慢；3)細胞傳代時間過晚：細胞中毒，影響傳代后的細胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細胞死亡；時間過短，細胞未完全分離而成團，細胞死亡；5)細胞的凍存與復蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細胞凍存或復蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
細胞形態(tài)特性：上皮樣
MM96L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細胞、DoHH2細胞、IEC18細胞
MDA231-LM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細胞、MA-782細胞、Reuber H-35細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
U-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞
HEK-293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV-304細胞、U-373 MG細胞、KPL-4細胞
RSC-96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
PL45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞
32Dc3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細胞、BMSCs（mBMSCs）細胞、BE(2)M-17細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
PANC403細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM223細胞、Hs294T細胞、H-929細胞
697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞
HANK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細胞、Hs274T細胞、NCI-H1618細胞
SW 948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細胞、Hs 766.T細胞、P31FUJ細胞
Hs863T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCIH1048細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
KYSE-510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞
2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細胞、SK HEP 01細胞、RLE-6TN細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細胞系
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
Hs-274-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細胞、HeLa S-3細胞、Pfeiffer細胞
HCFB（HCF）細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-231細胞、MG63細胞、OVCAR 420細胞
IEC-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH7777細胞、CTV1細胞、Kit 225細胞
SK-MEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細胞、NCIH2286細胞、NBL-2細胞
Panc 4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細胞、RTE細胞、NCI-H2452細胞
OCILY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
Caco2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細胞、OVCAR4細胞、LS174T細胞
MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
SUNE 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞
BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞
H-2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞
KTA-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag 1.2.3細胞、Colon-38細胞、HOS細胞
DH-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細胞、CMT167細胞、BC-009細胞
TSUpr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
SK ES 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細胞、PSN-1細胞、NCI-H1385細胞
BN-CL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細胞、OCI/AML-4細胞、Calu-3細胞
HT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細胞、HEK293EBNA細胞、OK細胞
TMK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC細胞、NCIH1819細胞、RSC-96細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
Henrietta Lacks cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞
NCI-SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIC細胞、WEHI-231細胞、PNT1/A細胞
REC 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-4006細胞、U266B1細胞、HOS (TE85, Clone F5)細胞
SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞
PC 61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細胞、Huh-7細胞、H-524細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細胞系
QSG7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細胞、CCRF-SB細胞、PGBE1細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
MGH-U3 (RN)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細胞、MCF-10 Attached細胞、BV-173細胞
NCI-H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞
Bac12F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
MFC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-L1細胞、C-Li-7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞
SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
IMR 32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細胞、MDA-MB-134 VI細胞、H1048細胞
16HBE14o-細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 3.27細胞、SGC7901細胞、HeLa/S3細胞
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
PANC-03-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
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