"HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞屬源于正常腎的近曲小管細(xì)胞，通過(guò)導(dǎo)入HPV-１６ E６/E７基因而獲得永生化。將含有HPV-１６ E６/E７基因的重組的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體pLXSN １６ E６/E７轉(zhuǎn)染外生包裝細(xì)胞Psi-２，Psi-２細(xì)胞產(chǎn)生的病毒再去感染兼嗜性包裝細(xì)胞系PA３１７，最后將PA３１７產(chǎn)生的病毒顆粒導(dǎo)入正常的腎皮質(zhì)近曲小管細(xì)胞。盡管pLXSN １６ E６/E７中含有新霉素抗性，但未用G４１８篩選轉(zhuǎn)導(dǎo)克隆。Southern和FISH分析顯示HK-２細(xì)胞來(lái)源于單克隆。PCR檢測(cè)證實(shí)HK-２細(xì)胞基因組中含有E６/E７基因。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
解凍細(xì)胞出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時(shí)細(xì)胞密度過(guò)低：推薦的解決方案：縮短解凍過(guò)程中的時(shí)間。將細(xì)胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^(guò)程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過(guò)程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長(zhǎng)緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細(xì)胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個(gè)T２５培養(yǎng)瓶中；２)細(xì)胞密度過(guò)低：通常解決方案是提高未來(lái)冷凍物種細(xì)胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個(gè)試管來(lái)進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：４傳代；２-３天換液１次
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題，客戶遇到的問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō)，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過(guò)低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過(guò)晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短：時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過(guò)短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無(wú)誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過(guò)驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無(wú)CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過(guò)程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤(rùn)洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實(shí)驗(yàn)，比如病毒包裝，對(duì)細(xì)胞代數(shù)，對(duì)細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個(gè)時(shí)候，胰酶消化，就是潤(rùn)洗，都會(huì)對(duì)細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會(huì)逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個(gè)時(shí)候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過(guò)影響ECM相關(guān)酶的活性，來(lái)使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過(guò)螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對(duì)付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個(gè)道理。一般不要試圖延長(zhǎng)消化時(shí)間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見(jiàn)的操作，因?yàn)镾erum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問(wèn)可以講，對(duì)于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因?yàn)檫@些離子也會(huì)抑制trypsin的活性。但對(duì)于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤(rùn)洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
MM96L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-767細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞、IEC18細(xì)胞
MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
U-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606細(xì)胞、293E細(xì)胞、CT26-clone 25細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
RSC-96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-52細(xì)胞、769-P細(xì)胞、SUM 52PE細(xì)胞
CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞
Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞
PL45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞
32Dc3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-M(TK-)細(xì)胞、BMSCs（mBMSCs）細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞
SNU-1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-2細(xì)胞、MSC細(xì)胞、SW-1353細(xì)胞
PANC403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM223細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞、H-929細(xì)胞
697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC3細(xì)胞、CCD 841 CoN細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
SW 948細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGc80-3細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞
Hs863T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1836細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
KYSE-510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR432細(xì)胞、KE37細(xì)胞、B78細(xì)胞
2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細(xì)胞、PK 15細(xì)胞、KY180細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
MDA468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞、HFSF細(xì)胞
OCI-Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細(xì)胞系
beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
HCFB（HCF）細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
IEC-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞
SK-MEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞
Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
CORL279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細(xì)胞、SR細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
Caco2BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5B1-4細(xì)胞、OVCAR4細(xì)胞、LS174T細(xì)胞
MIO-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL12細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞、ZR7530細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
SUNE 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Buffalo Rat Liver-3A細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GLAG-66細(xì)胞
LC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PAa細(xì)胞、EA. hy 926細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞
BE2_C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJRH30細(xì)胞、HN4細(xì)胞、AE1201細(xì)胞
H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞
KTA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞、HOS細(xì)胞
DH-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-03-27細(xì)胞、CMT167細(xì)胞、BC-009細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
BN-CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1271細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
TMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞
Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
NCI-H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞、BCAP37細(xì)胞
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞
NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞
REC 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-4006細(xì)胞、U266B1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
PC 61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCF-STTG1細(xì)胞、Huh-7細(xì)胞、H-524細(xì)胞
NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞
HK-2 [Human kidney] Thawing人腎小管上皮細(xì)胞系
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
MGH-U3 (RN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞、BV-173細(xì)胞
NCI-H1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320HSR細(xì)胞、HHUA細(xì)胞、ST486細(xì)胞
Bac12F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERF-LCMS細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞、H-28細(xì)胞
MFC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-L1細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞
SUM-149PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AU 565細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞
16HBE14o-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 3.27細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞
HREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1672細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
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