"SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細胞系
細胞背景資料:這株細胞源自胸水。沒有病毒顆粒。亞顯微結(jié)構(gòu)特征包括微絲和橋粒,肝糖原顆粒,大溶酶體,成束的細胞質(zhì)纖絲。SK-BR-3細胞株過表達HER2/c-erb-2基因產(chǎn)物。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細胞系
細胞生長:貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟:原代細胞培養(yǎng)成功以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或密度過大,營養(yǎng)障礙,影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株),可以進行細胞克隆,易于保存,但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料,便于實驗。【操作步驟】1)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液;2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜;3)置37℃孵箱或室溫(25℃溫度)下進行消化,2~5min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察,當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細胞間隙增大后,應(yīng)立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶內(nèi)加入Hanks液少量,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘留消化液沖掉,然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液,終止消化;5)使用彎頭吸管,吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液,按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔,以防用力過猛損傷細胞;6)用計數(shù)板計數(shù)后,分別接種于新的培養(yǎng)瓶中,置CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng);7)細胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般2~3d后應(yīng)換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面,即可使用;也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?!咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間,消化時間過短時,細胞不宜從瓶壁脫落,過長的消化會導(dǎo)致細胞脫落、損傷;2)掌握好消化濃度,當(dāng)消化液濃度過高時,消化時間應(yīng)縮短,過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿
傳代的操作步驟注意事項:1)操作前要洗手,進入超凈臺后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點燃酒精燈,操作在火焰附近進行,耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼,金屬器械燒灼時間不能太長,以免退火,并冷卻后才能夾取組織,吸取過營養(yǎng)液的用具不能再燒灼,以免燒焦形成碳膜。3)操作動作要準確敏捷,但又不能太快,以防空氣流動,增加污染機會。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分,工作臺面上用品要布局合理。5)瓶子開口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細胞傳代的操作步驟:1)吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)回縮,細胞間隙增大后,立即終止消化。4)吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時,動作要輕,以免把已松動的細胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細胞,使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。6)計數(shù)板計數(shù)后,把細胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細胞傳代的操作步驟:1)吸出細胞培養(yǎng)液,放入離心管中,離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液,加入適量之新鮮培養(yǎng)基,混和均勻后,依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
有關(guān)實驗室細胞培養(yǎng)基知識普及:經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng);MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度;BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細胞設(shè)計的,現(xiàn)在常用于貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調(diào)整為4500mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應(yīng)用于各種細胞類型,包括對營養(yǎng)成分要求苛刻的細胞;Ham’s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設(shè)計的,現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物,這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細胞系的培養(yǎng);RPMI 1640培養(yǎng)基是專為淋巴細胞培養(yǎng)而設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細胞的培養(yǎng)。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
PECAPJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT細胞、C518細胞、Hs611T細胞
786-O RCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMA 560細胞、Murine Carcinoma-38細胞、VK2/E6E7細胞
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
JIMT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HECV細胞、OCILY19細胞、SUPB15細胞
KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
WERI-Rb 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞
NCIH1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細胞、293 F細胞、Kasumi 1細胞
BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞
H596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10(Clone 4)細胞、CCD 19Lu細胞、Dakiki細胞
H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞
J 111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2030細胞、MRMT-1細胞、L929細胞
KP-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-S細胞、Colo-206F細胞、NCI-SNU-16細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、MOLT.4細胞、P3-Jiyoye細胞
VK2 (E6/E7)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320細胞、MDCK Type II細胞、SKGT4細胞
UO31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL-2細胞、MV-4:11細胞、293 HEK細胞
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
H2052_MM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
OCI-Ly 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
GB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞
U-373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Astrocyte type I clone細胞、FU-97細胞、DoTc2 4510細胞
KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
NCI-BL2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細胞、H3255_DA細胞、HO8910/PM細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細胞系
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞
OE33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞
WSU-HN13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細胞、H2073細胞、DAN-G細胞
Hx147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:343 MG細胞、BJAB細胞、COLO 394細胞
BC-020細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞
Mo7e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細胞、CAKI 2細胞、NCI-H510細胞
Kit 225 K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1385細胞、251 MG細胞、VMM5細胞
HDSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
PCI-04B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 39細胞、SUM 190PT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞
MLA 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細胞、CAL 51細胞、NCI-H1650細胞
GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
Fetal Human Colon細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
FRO81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細胞、SW1088細胞、NCI-H196細胞
Hs819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞
SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
NCI-H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞
HS-294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
Hs 695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
CF-1 MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
Hs 706.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC4細胞、HCC1438細胞、HCC-1599細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
L-5178-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞
H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
Fetal Human Colon細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154細胞、PBMC細胞、SR786細胞
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌細胞系
HT1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
Functional Liver Cell-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細胞、BC-3H-1細胞、CAMA1細胞
no.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE-2 [50.B1]細胞、THC-8307細胞、HCA-7細胞
SKMES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
RH35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞
U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
LA-795細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
IBRS2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2-4510細胞、NCI-H1092細胞、SW780細胞
R 2 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細胞、MDA-468細胞、HCEC-12細胞
LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
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