"WM266-4 Thawing人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
WM266-4 Thawing人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
【細(xì)胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多，輕微活動(dòng)，細(xì)胞雖然可以生長(zhǎng)但繁殖速度卻明顯減慢，而且細(xì)胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細(xì)胞站優(yōu)勢(shì)所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng)，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無(wú)菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞)，３７度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察。如果沒有細(xì)菌生長(zhǎng)就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時(shí)會(huì)影響細(xì)胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測(cè)細(xì)胞某項(xiàng)指標(biāo)前一定要撤去雙抗，以避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機(jī)消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時(shí)孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺(tái)\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺(tái)的風(fēng)機(jī)不能過(guò)大，風(fēng)機(jī)到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無(wú)菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時(shí)即可進(jìn)入操作。
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)分布不均勻，通常操作步驟：做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。但有時(shí)候鋪得不是很均勻：要么中間密周圍稀，要么周圍密中間禿頂。下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對(duì)于易于消化的細(xì)胞，我一般DPBS清洗一遍，加0.5ml胰酶潤(rùn)洗一遍（25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板），棄掉胰酶，37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右，鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。如果不夠，延長(zhǎng)消化時(shí)間。96孔板一般以100微升每孔接種，直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液，沿孔壁（稍離開一點(diǎn)孔底即可，不要離底太高）直接接入，移液器不需完全打到，輕輕按下即可，每鋪完一行換一次槍頭同時(shí)輕輕混勻細(xì)胞懸液。都加完后蓋上蓋子，左手輕輕扶住板的左邊，右手輕輕敲擊板的右邊緣，注意把握力度（我一般輕巧敲三下），太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆，將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)（逆時(shí)針效果不好），依次敲擊剩余三個(gè)邊，靜置約5分鐘，放入37度培養(yǎng)箱。6孔板、12孔板或24孔板，可采用將每個(gè)孔加入少量無(wú)血清培養(yǎng)基，晃動(dòng)浸潤(rùn)整個(gè)孔底，然后用移液槍吸至第二孔，同樣方法浸潤(rùn)孔底，其它孔依此類推，這樣整個(gè)孔底都是濕潤(rùn)的，細(xì)胞懸液會(huì)平鋪在整個(gè)孔底，注意加完細(xì)胞懸液后要放工作臺(tái)靜置一下。這個(gè)方法就是有點(diǎn)慢，但操作熟練了也不慢。也可以采用輕拍的方式，但力度沒有96孔板好掌握，效果沒有96孔板好。培養(yǎng)瓶里面加好細(xì)胞以后(比如傳代好/分好細(xì)胞以后)，先順時(shí)針搖晃3次，馬上逆時(shí)針搖晃3次。然后延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。放入CO2培養(yǎng)箱后,平放著培養(yǎng)瓶重復(fù)延X軸Y軸分別水平搖動(dòng)3次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
WM266-4 Thawing人黑素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
有關(guān)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)基知識(shí)普及：經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI １６４０、MEM、DMEM/F１２都是應(yīng)用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如M１９９、IMDM、L１５培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)；MEM是由Eagle’s基礎(chǔ)培養(yǎng)基(BME)發(fā)展而來(lái)的，其中增加了組分的范圍及濃度；BEM(DMEM)培養(yǎng)基是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在常用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM的基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的４倍，采用雙倍的HCO３-和CO２濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為１０００mg/L，后來(lái)為了某些細(xì)胞的生長(zhǎng)需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為４５００mg/L，這就是大家常說(shuō)的低糖和高糖了；aMEM含有附加的基酸、維生素以及核苷和脂肪酸，它可廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞類型，包括對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分要求苛刻的細(xì)胞；Ham’s F１２是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F１２還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)；RPMI １６４０培養(yǎng)基是專為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說(shuō)明書
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
P3-X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac 6細(xì)胞、SU-DHL-6細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
Hep2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-660細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞、LICR-LON-HN6-R細(xì)胞
Rat1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞、SW 780細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
COLO206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞
HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞
H-2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細(xì)胞、KE-39細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞
MOLT-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKBML細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞、BEL-7402細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
SW260細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-10細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞
E0771細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、BC-3-H-I細(xì)胞、kms 11細(xì)胞
SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293細(xì)胞、TE-10細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 229細(xì)胞、KYSE-410細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞
SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞
Evsa-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細(xì)胞、C42細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞
CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞
CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
JTC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞
HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
WM266-4 Thawing人黑素瘤細(xì)胞系
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞
LN-382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：W256細(xì)胞、SVGp12細(xì)胞、U-266細(xì)胞
bEND.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細(xì)胞、KP-N-NS細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞
HN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ANA-1細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞、OSA細(xì)胞
HCC9204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7402細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞
HuH-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCCAR細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞、Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞
SGC-996細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 604.T細(xì)胞、HCET細(xì)胞、LAN1細(xì)胞
NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞
Sp2/O-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUVEC細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞、H-87細(xì)胞
CCD841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Molm 14細(xì)胞、Hep2細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞
HuT 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 174T細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞、ST細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-019細(xì)胞、UM2細(xì)胞、LU-65M細(xì)胞
Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞
RAG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFTF細(xì)胞、OSRC2細(xì)胞、CD18細(xì)胞
ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞
ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
SKNO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-151細(xì)胞、IEC-18細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞
Hs445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞、CEM-C1細(xì)胞
NCI-H165細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H69C細(xì)胞、MC-4細(xì)胞、HPF細(xì)胞
CNE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE33細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞
OV 1063細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞、RL細(xì)胞
CNE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞
GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞
B16F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞
UCH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC10RGB細(xì)胞、LA-N-5細(xì)胞、H1944細(xì)胞
Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞
HCT_116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4-D6P2T細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞、WB F344細(xì)胞
MX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFE-145細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、N-2a細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
WM266-4 Thawing人黑素瘤細(xì)胞系
ZR75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、NCIH1650細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞
Caki-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 1細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞
HT144mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435細(xì)胞、HPAF細(xì)胞、CHL1細(xì)胞
Jijoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細(xì)胞、SRA 01/04細(xì)胞、Mo 59J細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞
BT474細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-727細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞、MS-751細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
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