"J82 Thawing人膀胱移行癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:電子顯微鏡下未觀察到橋粒但觀察到數(shù)目不同的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和突出微絲。 含ras (H-ras)癌基因。
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
J82 Thawing人膀胱移行癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長:貼壁
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細(xì)胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液;3)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(0.1ml/部位,>106細(xì)胞)。初次接種成功率低,細(xì)胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間?!靖顾龅慕⑴c腹水瘤的接種】將實體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細(xì)胞,將這種腹水反復(fù)傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞),反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細(xì)胞;3)接種腹水瘤細(xì)胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項:實驗進(jìn)行前,超凈臺用紫外燈照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面,并開啟超凈臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10min左右再開始實驗操作。實驗用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi);實驗用品用完應(yīng)移出超凈臺,以利于氣流的流通。實驗完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。每次操作只處理一種細(xì)胞;即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基,避免細(xì)胞間的交叉污染。操作時小心取用無菌的物品,避免污染。勿碰觸吸管尖頭,不小心碰觸后應(yīng)立即更換;不要在打開的容器瓶口正上方操作,容器打開后,傾斜45°操作,操作完成后及時蓋上瓶蓋。CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方,應(yīng)1-2個月對培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次,用雙蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水(應(yīng)每周更換),待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
J82 Thawing人膀胱移行癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題,見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié),這里說一些我個人的經(jīng)驗,因為一些比較特殊的原因,我自己培養(yǎng)接觸過近300種細(xì)胞,常用于做實驗的,累積有百余種,可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題,并不是因為細(xì)胞消化最重要,而是近期看到大家頻繁討論這個話題,我就拋磚引玉,下面幾點拙見,可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入,僅供大家參考。許多同學(xué)對細(xì)胞消化做了許多研究,得出了很多有價值的經(jīng)驗,也見到很多人的困惑。其實細(xì)胞培養(yǎng),尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng),就消化而言,不是太難,做得多了,善于總結(jié)經(jīng)驗,就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟,細(xì)節(jié)操作,我這里就不講了,只講一些基本操作背后的知識,如果不對之處,歡迎指正,總結(jié)下來,細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要,但其實消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要),關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源,血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題,很多時候bottleneck沒有找到,雖然通過其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作,總覺得自己沒有經(jīng)驗,而忽視試劑,溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量,后者其實才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣
NFS 60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞、Malme3M細(xì)胞
CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
SCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL-2細(xì)胞、LNCaP subline C4-2細(xì)胞、PIG3細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
Ramos 2G6 4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-04-03細(xì)胞、TE-85細(xì)胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細(xì)胞
HuT78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR1-K細(xì)胞、MHCC 97細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞
CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
SNU1040細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE14o-細(xì)胞、PLA-801D細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞
COR-L26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ 138細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞、JB-6細(xì)胞
HAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC95細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞
SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞
S3 HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB 231細(xì)胞、MPVECs細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞
Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞
HSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細(xì)胞、AC29細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞
SU-DHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH8994細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞、H184A1細(xì)胞
OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞
J82 Thawing人膀胱移行癌細(xì)胞系
H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細(xì)胞、U20-S細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞
SUDHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M (TK-)細(xì)胞、SV-HUC細(xì)胞、NCTC929細(xì)胞
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞
HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞
Hs675細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1755細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、Panc 1細(xì)胞
CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞
Detroit-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞
NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞
MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CALU1細(xì)胞、GT38細(xì)胞、ARPE-19細(xì)胞
MES-SA Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、C-33 A細(xì)胞
Y3-Ag123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-1細(xì)胞、SK RC 20細(xì)胞、Hep-G2/C3A細(xì)胞
Panc_04_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細(xì)胞、J 111細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞
NCIH1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1385細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞、PL11細(xì)胞
MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
KCL-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、MKN28細(xì)胞、SaOS細(xì)胞
EOMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞、H-548細(xì)胞
DR2R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細(xì)胞、DLD 1細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞
SK-N-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274.T細(xì)胞、IM-95細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞
HEK293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細(xì)胞、NCIH2110細(xì)胞、3AA細(xì)胞
NSC34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2/cl.D1細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞
SF-763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF SB細(xì)胞、RH8994細(xì)胞、L cell line細(xì)胞
G-292, clone A141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766.T細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞、MT4細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
no-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaca.2細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞、HRIF細(xì)胞
NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞
AQ-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149PT細(xì)胞、NCI522細(xì)胞、Jurkat E6.1細(xì)胞
Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞
JJN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC1細(xì)胞、CW2細(xì)胞、UMUC14細(xì)胞
NCI-H128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO.31細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
J82 Thawing人膀胱移行癌細(xì)胞系
TE-85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞、COLO-320細(xì)胞
hA549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞
High 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 327細(xì)胞、MA104細(xì)胞、MKN7細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
HEK 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR 146細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞
RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
SKGT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEND細(xì)胞、HCC15細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞
NCI H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-747細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞、SCCVII細(xì)胞
PC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細(xì)胞、C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞、H2141細(xì)胞
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