"UM-UC-3 Thawing人膀胱移行癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
UM-UC-3 Thawing人膀胱移行癌細胞系
細胞生長：貼壁
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細胞生長。細胞由原培養(yǎng)瓶內分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細胞允許培養(yǎng)的細胞擴增(形成細胞株)，可以進行細胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細胞和分化特征。傳代細胞形成細胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內舊培養(yǎng)液；２)向瓶內加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)胞質回縮、細胞間隙增大后，應立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內加入Hanks液少量，輕輕轉動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內培養(yǎng)液，按順序反復輕輕吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細胞培養(yǎng)換液時間應根據(jù)細胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應換一次生長液。待細胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細胞消化的時間，消化時間過短時，細胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導致細胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當消化液濃度過高時，消化時間應縮短，過低時細胞消化時間相對延長。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UM-UC-3 Thawing人膀胱移行癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
RH30SJ細胞系相關產品：End1/E6E7細胞、TCC-SUP細胞、HT22細胞
CFPAC細胞系相關產品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
HS-683細胞系相關產品：HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
PK-13細胞系相關產品：PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞
GalK1細胞系相關產品：CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
TYKnu細胞系相關產品：NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
SW 837細胞系相關產品：NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產品：NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
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JJN3細胞系相關產品：DrG細胞、SK-RC 39細胞、MiaPaca.2細胞
JS1細胞系相關產品：786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
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WM239細胞系相關產品：GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
GC-1spg細胞系相關產品：SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
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MDAMB415細胞系相關產品：293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
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293S細胞系相關產品：CL-34細胞、LC1sq細胞、RBL-2H3細胞
HCT 8細胞系相關產品：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
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B-104細胞系相關產品：COLO-320DM細胞、SaOS細胞、RMS 13細胞
L-02細胞系相關產品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
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H-1341細胞系相關產品：A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
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BSC40細胞系相關產品：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
Strain KB細胞系相關產品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關產品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
U-373 MG細胞系相關產品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
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TCam-2細胞系相關產品：SKMES-1細胞、NB-9細胞、HFF細胞
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NCTC 929細胞系相關產品：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
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UM-UC-3 Thawing人膀胱移行癌細胞系
L cells (TK-)細胞系相關產品：Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
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