"COLO 320HSR Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９８４年建系，源自一位３３歲患有大腸腺癌男性經(jīng)５-fu治療后的腹水。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
COLO 320HSR Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞生長：貼壁
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代。３天內(nèi)可長滿。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COLO 320HSR Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
細胞生長特性：半貼壁生長
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
WM35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
Hs 766.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞
SF-539 BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL1細胞、Liver-02細胞、RMC細胞
IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞
C22細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 420細胞、Ca759細胞、NCIH1417細胞
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
IMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
SNU520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
CA-OV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細胞、JB 6細胞、SK HEP 01細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RGM-1細胞、OCI-Ly 1細胞
SUM190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 780細胞、JURKAT E-61細胞、SCC15細胞
OKT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
CV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
Colon38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
MXI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞
HCCC-9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
PC3M-IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NWA細胞、SW-1417細胞、X63.Ag8.653細胞
COLO 320HSR Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
HEC1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HConEpic細胞、HT 1376.T細胞、GDM-1細胞
NCI-H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細胞、MSB1細胞、OsA-CL細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
AN3-CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M20細胞、GM16136細胞、SNK-1細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
CPAE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞
L-6 myoblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30-OHKUBO細胞、SKCO-1細胞、TALL-104細胞
OCI-LY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
SCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞
T 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
UPCISCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC133細胞、SK-N-BE(1)n細胞、138 MG細胞
95C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細胞、Lu-99A細胞、UO.31細胞
Hs 742.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細胞、H-1435細胞、B16 subline B78細胞
CHO-Lec1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1963細胞、H4-II-EC3細胞、A2780CP細胞
HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
Tu686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-RO 81細胞、SUM102細胞、RPMI8402細胞
HEC-1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
MDA-MB-134VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML3細胞、LM-TK-細胞、NCI-H2087細胞
EOC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞
JHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 153細胞、KCL22細胞、675T細胞
DiFi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
SKMEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone 3細胞、UMNSAH/DF-1細胞、RGC6細胞
LTPA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞
BHT101細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
SuDHL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.Bst細胞、LS-411細胞、ChaGo K-1細胞
P3/ag細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞
MODE-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
NCI-H1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
COLO 320HSR Thawing人結(jié)直腸腺癌細胞系
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
CMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1573細胞、JHH2細胞、mREC細胞
TMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
H-1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
Z138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H520細胞、HeLa 229細胞、KATOIII細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
H-2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細胞、NuTu-19細胞、HCC-1569細胞
SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
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