"LS174T Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：LS １７４T是LS １８０ (ATCC CL １８７)結(jié)腸腺癌細(xì)胞株的胰蛋白酶化變種。 它比親本更易傳代，象LS １８０一樣生成大量的癌胚抗原(CEA)。 電鏡研究表明有豐富的微絲和細(xì)胞質(zhì)粘液素液泡。 直腸抗原３陽性。 p５３抗原表達(dá)陰性，但mRNA表達(dá)陽性。 與ATCC CL-１８７來源于同一個腫瘤。LS １７４T細(xì)胞角蛋白染色陽性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表達(dá)呈陽性。 癌基因k-ras和sis的表達(dá)未做檢測。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
LS174T Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長：貼壁
養(yǎng)了幾年細(xì)胞，說一點自己培養(yǎng)細(xì)胞方面的看法：１)培養(yǎng)細(xì)胞前，可以看看細(xì)胞特點說明書，包括細(xì)胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等；２)不同細(xì)胞生長周期不同，有的生長很快，比如說MDA-MB-２３１，傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了，有的又是特別慢，等的人心焦，BT４７４就是，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時候兩周多才能長滿，所以就要在培養(yǎng)細(xì)胞的過程中多多摸索了；３)對于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)了，胰酶消化不能過久，吹得時候要輕柔，離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間，每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況；４)凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基；５)培養(yǎng)箱隔一段時間徹底用酒精棉擦洗一次；６)養(yǎng)細(xì)胞的教訓(xùn)：不能偷懶!細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。１)不管買的細(xì)胞、惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊做兩件事：檢測是否有支原體污染; 迅速擴(kuò)增凍存；２)發(fā)現(xiàn)有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時; 細(xì)菌污染，真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，買個支原體檢測的kit定期檢測一下；３)傳代細(xì)胞日常的值日清潔是必須的，此外還要定期熏蒸；４)細(xì)胞的傳代一定要規(guī)律，保持相同的confluency和傳代時間間隔，不要隨心所欲或者拖延；５)注意個人衛(wèi)生。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
懸浮細(xì)胞不容易轉(zhuǎn)染：懸浮細(xì)胞是指細(xì)胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細(xì)胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，其和貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理，先形成脂質(zhì)體-DNA復(fù)合物，散布在細(xì)胞周圍，然后通過細(xì)胞的內(nèi)吞作用，將目的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，而脂質(zhì)體復(fù)合物與貼壁細(xì)胞的接觸機(jī)會比懸浮細(xì)胞高出很多倍，所以，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細(xì)胞。其次，脂質(zhì)體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外，懸浮細(xì)胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細(xì)胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率，可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法，針對懸浮細(xì)胞等難轉(zhuǎn)染細(xì)胞還是挺不錯的，電擊對細(xì)胞有一定的損傷，選用具有細(xì)胞膜修復(fù)功能的電轉(zhuǎn)染試劑，可以將電擊對細(xì)胞的傷害降到最低，懸浮細(xì)胞不易轉(zhuǎn)染，選對試劑及良好的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境才是關(guān)鍵。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LS174T Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
NSI/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2066細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞
MiaPaCa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC151細(xì)胞、CA 46細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞
CEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、343 MG細(xì)胞、MALME 3M細(xì)胞
RCK8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954BL細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞
IMR-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRcl細(xì)胞、SKNF1細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞
KYSE30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7/WT細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞、HCA7細(xì)胞
10RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM1A細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞
NCI H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB9細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞、J45.01細(xì)胞
WILL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-128細(xì)胞、CORL279細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 375細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞
HRVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCK-81細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞、L-6細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞
NCI-H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJCRH30細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞、H2170細(xì)胞
DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1184細(xì)胞、HEK 293A細(xì)胞、SK LU 1細(xì)胞
Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW756細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-48細(xì)胞
NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞
SK-MEL28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細(xì)胞、Hs863T細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞
RMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-2細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞
NHEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 435細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞
HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞
LS174T Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞
Colo-201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 MI細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞
L-WRN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-1細(xì)胞、NCIH1836細(xì)胞、CW-2細(xì)胞
Lewis Lung Cancer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞、Caki-1細(xì)胞
NCIH2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-422細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞
JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
118 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細(xì)胞、LK-2細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞
C-4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞、CCRF/CEM細(xì)胞
SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞
PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞
NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞
PANC3.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-B細(xì)胞、AU 565細(xì)胞、SNGM細(xì)胞
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
SUM159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DH-82細(xì)胞、GM02132C細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞
HEK 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR 146細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞
MO59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞
SF539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞
MCF 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-GP細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞
ssMCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞
P3X63NS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 30細(xì)胞、RSC 96細(xì)胞、VP 267細(xì)胞
Colon-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM/0細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞
H4IIE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1975細(xì)胞、M109細(xì)胞、C4I細(xì)胞
Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞、NCIH847細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
U118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2141細(xì)胞、TCCSUP細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
LS174T Thawing人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞系
SVG(P12)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH1細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞、COLO320-DM細(xì)胞
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞
TCC-PAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、LMH細(xì)胞、IOSE-Van細(xì)胞
293 Ad5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MO59J細(xì)胞、639V細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞
Clone 15 HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578Bst細(xì)胞、CW-2細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞
GM02131A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F10細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞、MDA MB 453細(xì)胞
B 95-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-4細(xì)胞、HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞
Rat Fetal Lung-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 [Mouse]細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞
hESC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCAP37細(xì)胞、TE12細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞
BTI-Tn-5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMC細(xì)胞、H1581細(xì)胞、OKT 3細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
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