"KMH-2 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:未分化甲狀腺癌;男性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時,需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
KMH-2 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞,可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代,部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細(xì)胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補(bǔ)加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進(jìn)入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,步驟7-9不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞
HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞
MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
KMH-2 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
以下對初次培養(yǎng)細(xì)胞人員來說,是非常好的開門教程:準(zhǔn)備室的設(shè)備:單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜(放置未消毒物品)、儲品柜(放置消毒過的物品)、包裝臺;配液室的設(shè)備:扭力天平和電子天平(稱量藥品)、PH計(測量培養(yǎng)用液PH值)、磁力攪拌器(配置溶液室攪拌溶液);培養(yǎng)室的設(shè)備:液氮罐、儲品柜(存放雜物)、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱(-80℃)、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺(書寫實驗記錄);必須放在無菌間的設(shè)備:離心機(jī)(收集細(xì)胞)、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱(孵育培養(yǎng)物)、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱(放置serum和培養(yǎng)用液)。無菌室的滅菌:定期打掃無菌室:每周打掃一次,先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等,然后用3‰來蘇爾或者新潔爾滅或者0.5%擦拭;CO2孵箱(培養(yǎng)箱)滅菌:先用3‰新潔爾滅擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%,再用紫外燈照射;實驗前滅菌:打開紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘;實驗后滅菌:用75%酒精(3‰新潔爾滅)擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺;實驗人員的無菌準(zhǔn)備:肥皂洗手、穿好隔離衣、帶好隔離帽、口罩、放好拖鞋、用75%酒精棉球擦凈雙手。
Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞、LP1細(xì)胞
NBLAN5T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞、CEK細(xì)胞
KYSE 510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1105細(xì)胞、RK 13細(xì)胞、Hs737T細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
M-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細(xì)胞、NIH 3T6細(xì)胞、BNL-CL.2細(xì)胞
PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
CCF-STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2J細(xì)胞、ME 180細(xì)胞、NCI-H1184細(xì)胞
PC 61-5-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637細(xì)胞、NIH-3T3細(xì)胞、BNL.CL2細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
KMH-2 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞
Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞
RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞
PFSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細(xì)胞、Tu-212細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
NCI-H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH-a細(xì)胞、C8166-CD4細(xì)胞、H-196細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCM460細(xì)胞、HNE2細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞
CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU 1細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞、HCC0827細(xì)胞
A204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT 102細(xì)胞、KY-270細(xì)胞、TK10細(xì)胞
MLTC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細(xì)胞、HemECs細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細(xì)胞、28SC細(xì)胞、LS-123細(xì)胞
3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞
AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
HCC1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞、SU86-86細(xì)胞
ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞
NBLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
NCI-H2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細(xì)胞、MC38細(xì)胞、Tu 212細(xì)胞
CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
MILE SVEN 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3 CA細(xì)胞、Ha Fe細(xì)胞、GM04154細(xì)胞
NCI/ADRRES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:118 MG細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞、ACCM細(xì)胞
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
NCIH526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc8.13細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2C8細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞、U266細(xì)胞
ARH-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL-6細(xì)胞、NCI-N87細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞
CD 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU1919細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞、HR-8348細(xì)胞
CMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DB細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞、FBHE細(xì)胞
SJ-Rh 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細(xì)胞、H716細(xì)胞、RKN細(xì)胞
PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞
JEG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細(xì)胞、CCRF-CEM C1細(xì)胞、HuO9細(xì)胞
MES-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSK-1細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
RBE4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95-8細(xì)胞、MCF-12F細(xì)胞、NCIH522細(xì)胞
KMH-2 Adherent人甲狀腺癌細(xì)胞系
P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞
HEK-AD 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細(xì)胞、M059K細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
OCILY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細(xì)胞、SUM149細(xì)胞、CV-1細(xì)胞
RKO-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RetroPack PT67細(xì)胞、HMEL細(xì)胞、SF126細(xì)胞
SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞
HEYA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞、FET細(xì)胞
CCRF.CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML2細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞
CMT.64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv.1.Lu細(xì)胞、EFM192細(xì)胞、PBL細(xì)胞
PA-TU S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞
T_T_細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、L 540細(xì)胞
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