"KMH-2 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系
細胞背景資料:未分化甲狀腺癌;男性
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
SCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
細胞生長:貼壁
KMH-2 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
WM 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FU-OV-1細胞、N-2a細胞、BT325細胞
SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
SW 837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細胞、NCM-460細胞、Kasumi-1細胞
JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞
HUT 125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP a2細胞、TPC1細胞、SW260細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KMH-2 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞
NS1-Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL2細胞、MDA-MB-175細胞、BHK細胞
MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSK-1細胞、CTLL(2)細胞、Calu3細胞
DMS-114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細胞、253J細胞、293AD細胞
TE5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-9D細胞、NCI-H2066細胞、TE-5細胞
CCLP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW-039細胞、CORL51細胞、A20細胞
Bowes melanoma cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
T-47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-TN5B1-4細胞、Panc_08_13細胞、KMST6細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
KMH-2 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
BNL-HCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細胞、Vero細胞、QGY細胞
P3HRI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
HEK293EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4 C細胞、NCIH2110細胞、3AA細胞
HSC 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P1-Raji細胞、YES2細胞、SNU368細胞
EMT-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL2細胞、MCM細胞、GA-10細胞
CL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
TE-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞
HEK;293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞
WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞
SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細胞、SW1417細胞、LN-382細胞
LLCMK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L615細胞、Hs888Lu細胞、Hs_578t細胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞
H1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.Lu細胞、H-2122細胞、LA795細胞
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
32D-Cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FT-293細胞、Co 115細胞、H1581細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
GM03569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細胞、NCIH3255細胞、BV2細胞
KNS81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞
HaCaT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-1-N-1細胞、Be Wo細胞、MGSMC細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
NTC-200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-05.04細胞、MDAMB-231細胞、K7M2 wt細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
KAT5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3.1細胞、MHH-CALL2細胞、H-1404細胞
D341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A172細胞、ZR-75-30細胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
SW1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細胞、CACO2細胞、C-4I細胞
CHP-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細胞、CAL-33細胞、HPDE6c7細胞
SW756細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞
MBT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY-A8細胞、HT-1376細胞、EC109細胞
KMH-2 epithelioid cells人甲狀腺癌細胞系
7404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4-1st細胞、Hs 706.T細胞、Hs 821.T細胞
RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細胞、CaES-17細胞、OEC19細胞
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細胞、RD-ES細胞、LM2-4175細胞
MES-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSK-1細胞、LOU-NH-91細胞、NCI-H209細胞
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