"MMQ Adherent大鼠垂體瘤細胞系
細胞背景資料:垂體瘤
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞,顯微鏡下觀察,待細胞變圓,細胞間隙明顯,部分細胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長,此時細胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補液時,需避免反復(fù)吹打。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
MMQ Adherent大鼠垂體瘤細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應(yīng)立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
SCC 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE-12細胞、SK-MEL-24細胞、GM03671C細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDA-MB-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞
DrG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1373細胞、OAW42細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
細胞生長特性:懸浮
MMQ Adherent大鼠垂體瘤細胞系
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
【凍存細胞操作】1)選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10(7)/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO) 或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細胞操作】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達到10(7)/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10(5)/ml數(shù)量。
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞
AMJ2-C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
COLO 394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞
H292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞
HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
Tsup-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCFSTTG1細胞、58F細胞、HCC-1954BL細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
ESC-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-143B細胞、FOXNY細胞、HANK-1細胞
MMQ Adherent大鼠垂體瘤細胞系
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
DH 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549/DDP細胞、MEG01細胞、IMR 32細胞
NRK 52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR8細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞、GC-1細胞
H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
LN-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLK細胞、RH30SJ細胞、WM 266-4細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
EM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb-1細胞、SUP T1細胞、CNE-2細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞
MDA-PCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2110細胞、HT144mel細胞、MLMEC細胞
H378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
H-EMC-SS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細胞、HS 683T細胞、U-373 MG細胞
PTK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞
BT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細胞、SHP-77細胞、SCC25細胞
GOS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH660細胞、H-28細胞、LAN-1細胞
MA-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rin-M-5F細胞、RT4-D6P2T細胞、UMR106細胞
AML-EOL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS1細胞、FAK+/+細胞、NCI-H2009細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
HEK;293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954 BL細胞、B16/F1細胞、PaTu 8988 S細胞
P31-FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
ECC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT116細胞、AM-38細胞、UPCISCC090細胞
CHL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞
HFTF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細胞、AX-Mel細胞、NCIH1048細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
UMUC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN3細胞、hTERT-RPE1細胞、Rat Lung-65細胞
ML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA細胞、H2452細胞、NCIH508細胞
CHO/dhFr-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK細胞、NOK細胞、HT 115細胞
NCIH1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
MMQ Adherent大鼠垂體瘤細胞系
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
143 B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
NCIH716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細胞、3D4/21細胞、AMJ2C8細胞
NCIH1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細胞、LAN1細胞、KP-N-YN細胞
Jurkat-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞
HL 60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 948細胞、B-104細胞、RERFLCMS細胞
Adeno 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-824細胞、Hep-G2/C3A細胞、HCAEC細胞
B95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 32.T細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、CV 1細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細胞、IMR32細胞、NK-10A細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、KU19-19細胞、MH-22a細胞
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