"M619 Adherent人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:脈絡(luò)膜黑色素瘤;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代:去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;棄PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察,待細(xì)胞變圓,細(xì)胞間隙明顯,部分細(xì)胞剛開始脫離瓶壁,加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化,將細(xì)胞小心吹打下來,1000rpm/min室溫離心5min;棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代:一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,將細(xì)胞懸液移入離心管中,1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清,細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸,按要求分瓶(視細(xì)胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長,此時細(xì)胞生長狀態(tài)良好,當(dāng)補(bǔ)液時,需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
M619 Adherent人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
購買細(xì)胞注意事項:1)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系;2)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等;3)用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次;4)建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流?!炯?xì)胞傳代操作步驟】一、貼壁細(xì)胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi);2)吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡;5)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細(xì)胞傳代:1)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液;3)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
NCI-H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCSUP細(xì)胞、H1703細(xì)胞、LYR細(xì)胞
TE671/RD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB-F344細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞、SNU739細(xì)胞
Hs343T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon 26細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8505C細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞
LN299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞、EB-1細(xì)胞
KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
M619 Adherent人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點(diǎn)越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈;2)不要頻繁看細(xì)胞。對于初學(xué)者而言,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細(xì)胞對細(xì)胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞,細(xì)胞老是長不好。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過度,早早地終止消化。細(xì)胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細(xì)胞也沒事。我一般是等細(xì)胞完全變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大,對細(xì)胞的傷害也是很大的。
T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞
WEHI231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN6細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
HCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
H1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D:A細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞、H-1666細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
GM05372E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU423細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞
MES 23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2A細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞
HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
Jeko1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞
SCC-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細(xì)胞、SK-MEL-1細(xì)胞、OB2細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
M619 Adherent人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞系
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR-OV1細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞
Granta-519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞
Granta-519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細(xì)胞、RPMI 8226/S細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
JEG-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295R細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞
TOV112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞
LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-520細(xì)胞、ISHI細(xì)胞、GM12878細(xì)胞
HCC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1588細(xì)胞、REC細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞
Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WPMY-1細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞
AMJ2-C8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細(xì)胞、CHO K1細(xì)胞、SGC 7901細(xì)胞
NCI-H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-104細(xì)胞、6-10B細(xì)胞、H-1915細(xì)胞
HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞
C-28I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細(xì)胞、H-1650細(xì)胞、NCI-H1993細(xì)胞
WIL2 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞
JCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTC-200細(xì)胞、H-1975細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞
BEL7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Detroit562細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞、SACC83細(xì)胞
U-343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細(xì)胞、SW480E細(xì)胞、DB細(xì)胞
SPCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細(xì)胞、BC-020細(xì)胞、CAL62細(xì)胞
GM00637H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A101D細(xì)胞、SUDHL16細(xì)胞、IM-95細(xì)胞
SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞
MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞
SW-1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SEG1細(xì)胞、GTL 16細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞
PANC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIEC-6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞
Wistar Institute-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK(15)細(xì)胞、WM115細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
AR-42J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細(xì)胞、RAEC細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞
GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
KP4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS653細(xì)胞、F9細(xì)胞、VP229細(xì)胞
DMS 114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175VII細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細(xì)胞
NCI-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL1細(xì)胞、SW 48細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞
18G3.cl 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細(xì)胞、NCI H157細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞
H211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞、HGE細(xì)胞
Mel-RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB436細(xì)胞、DR2R1610細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞
SKNBE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、IMCD3細(xì)胞、SCL I細(xì)胞
NSI/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2066細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞
DMS 153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs852T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、T/G HA VSMC細(xì)胞
HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞
M619 Adherent人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞系
TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞
H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞
RFL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC2B細(xì)胞、PG13細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞
MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞
T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
Panc-10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞、Rat1細(xì)胞
N-Tera-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-2H3細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞
COLO-320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細(xì)胞、HTSMC細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
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