"M619 Cell:人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:脈絡(luò)膜黑色素瘤;女性 ECC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細胞、GM-3573細胞、DKMG細胞 JVM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細胞、MES-SA/Dx-5細胞、SKHEP1細胞 FL 62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細胞、NCI-SNU-216細胞、KPL-1細胞 HCMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2B細胞、LAD-2細胞、Hs706T細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 M619 Cell:人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞 JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞 IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞 SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞 SNU398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞 細胞生長特性:貼壁 M619 Cell:人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞系 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞 L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞 MAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2B細胞、HCC-1428細胞、SACC-LM細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞 CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞 AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞 TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞 M619 Cell:人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞系 ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞 H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞 NCI-H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1細胞、159PT細胞、XWLC-05細胞 SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞 Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞 U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞 HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞 NCIH1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細胞、Hs 683細胞、A-172MG細胞 MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞 MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞 ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞 OVCAR 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb-2細胞、MTC-TT細胞、SW527細胞 COR-L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-E6細胞、AtT 20細胞、NALM-6細胞 TE671/RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WB-F344細胞、NCIH345細胞、SNU739細胞 JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞 JKT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-5細胞、PC3M-1E8細胞、CAL 120細胞 PVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y細胞、MDAMB453細胞、HeLaS3細胞 A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞 NCIH1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞 H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H522細胞、MEF (CF-1)細胞、Jurkat E6-1細胞 Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞 COLO320 DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 7860細胞、A431/P細胞、MDA-1386細胞 Hs683T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細胞、PBL細胞、HTori3細胞 TGHAVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細胞、Hs839.T細胞、Raji細胞 CHP-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞 HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞 Caki-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA-87細胞、NCIH929細胞、GM-3573細胞 Panc 04.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞、L428細胞 J82 COT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-1細胞、Namalva細胞、NCIH196細胞 HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞 NB.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞 Becker細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI38細胞、L cell line細胞、PCI:SG231細胞 Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞 HeLa/S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、NCTC1469細胞、GP-293細胞 Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞 KTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226細胞、UMC11細胞、A 375細胞 CHL/IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-747細胞、DoTc2細胞、MOLP8細胞 GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞 LC1/Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞 3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞 Balb/c3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21AE細胞、DLM8細胞、BL6細胞 MALME.3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞 NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞 M619 Cell:人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞系 JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞 MKN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞 TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞 Ly8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx-2細胞、LU451細胞、CWR22-Rv1細胞 H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞 MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞 NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞 Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞 B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞 MDCK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 KYSE-410細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞 HeLaS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、H-187細胞、MOVAS細胞 "
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