"HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：支氣管上皮細(xì)胞；HPV１６轉(zhuǎn)化；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
貼壁細(xì)胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細(xì)胞，顯微鏡下觀察，待細(xì)胞變圓，細(xì)胞間隙明顯，部分細(xì)胞剛開(kāi)始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細(xì)胞小心吹打下來(lái)，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補(bǔ)足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時(shí)，將細(xì)胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細(xì)胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細(xì)胞趨于成團(tuán)生長(zhǎng)，此時(shí)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好，當(dāng)補(bǔ)液時(shí)，需避免反復(fù)吹打。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇：細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-１９６℃液氮中，儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。【凍存細(xì)胞】１)選對(duì)數(shù)增生期細(xì)胞(證明無(wú)支原體污染)，在凍存前１d換液；２)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細(xì)胞制備成懸液，計(jì)數(shù)，使細(xì)胞密度達(dá)５×１０／ml左右密度，離心，去上清；３)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中，然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。凍存細(xì)胞時(shí)培養(yǎng)液中加入保護(hù)劑１０％二甲基亞砜(DMSO)或甘油，可使冰點(diǎn)降低，使細(xì)胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)胞外；４)分裝于無(wú)菌凍存管中，每管加１.５m懸液；５)旋好凍存管并仔細(xì)檢查，一定要蓋緊，做好標(biāo)記；６)凍存：在特殊的儀器或簡(jiǎn)易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min時(shí)間內(nèi)，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度，過(guò)快能影響細(xì)胞內(nèi)水分透出，太慢則促進(jìn)冰晶形成。操作時(shí)應(yīng)戴防護(hù)眼鏡和手套，以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細(xì)胞】１)從罐中取出凍存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不時(shí)搖動(dòng)，使其急速融化，３０～６０s內(nèi)完成；３)凍存管用７０％酒精擦拭消毒后，打開(kāi)蓋子，用吸管將細(xì)胞懸液注入離心管中，再滴加１０ml培養(yǎng)液；４)低速離心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培養(yǎng)液洗一次；５)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，裝入培養(yǎng)瓶３７℃培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后，繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進(jìn)行培養(yǎng)。凍存細(xì)胞數(shù)量要充分，密度應(yīng)達(dá)到１０／ml，在融后稀釋?zhuān)玻氨稌r(shí)，仍能保持５×１０／ml數(shù)量。
4T1.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHG-44細(xì)胞、143 B細(xì)胞、Colon26細(xì)胞
Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
LS 174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 445T細(xì)胞、P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、L 540細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹：１)CO２培養(yǎng)箱：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要；２)烘箱(干燥箱)：用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到１６０℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至１００℃時(shí)，停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。消毒后不能立即打開(kāi)箱門(mén)，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂，應(yīng)等溫度自然下降至１００℃以下后可開(kāi)門(mén)。３)超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。４)液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。５)超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過(guò)夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對(duì)于不需要長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。６)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。７離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。除上述儀器外，移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見(jiàn)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細(xì)胞、FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、TE-15細(xì)胞
CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
WSU-DLCL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細(xì)胞、MuM-2C細(xì)胞、H.Ep.-2細(xì)胞
RWPE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞、DMS 153細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞
COLO 320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1.2細(xì)胞、R2C細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞
NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞
H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞、PG-BE1細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
HCC-1569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSUDLCL2細(xì)胞、AN3 CA細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞
FU-OV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH526細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞
TPC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS23細(xì)胞、D407 RPE細(xì)胞、RTE細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
NRK 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8細(xì)胞、Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞、GC-1細(xì)胞
SPC-A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H548細(xì)胞、NCIH1793細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞
NCI-H1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H748細(xì)胞、L363細(xì)胞、Hs 870.T細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞
MDCK (NBL-2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-26細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞
NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞
108CC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
BTI-Tn5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 281.T細(xì)胞、CNE2細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞
WB F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HSC細(xì)胞、LS-174T細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞
Hs 888.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT細(xì)胞、PL12細(xì)胞、P3J細(xì)胞
Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞
Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細(xì)胞、P-19細(xì)胞、COR-L 105細(xì)胞
A 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、MSB1細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
LNCaP C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB1細(xì)胞、HCE細(xì)胞、MAD109細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
Jiyoye(P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞、ECC1細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞
NCIH2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞
HBE135-E6E7 Adherent人支氣管上皮細(xì)胞系
R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
Line 522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細(xì)胞、F442-A細(xì)胞、hMSC-BM細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
OCI-Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細(xì)胞、WERI-Rb-1細(xì)胞、PLA801D細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
MHCC97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細(xì)胞、SACC83細(xì)胞、NCI-H2126細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
SL-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB39細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞、E0771細(xì)胞
OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-5細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
SUDHL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-81細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、SW-403細(xì)胞
A-101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML-3細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞
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