"HBE135-E6E7 Cell:人支氣管上皮細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:支氣管上皮細胞;HPV16轉(zhuǎn)化;男性 SNB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞 HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞 SK N SH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞 RetroPack PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAD109細胞、CAL78細胞、T84細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HBE135-E6E7 Cell:人支氣管上皮細胞系 細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 如何進行細胞復蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。【溫馨提醒】1)從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 8305C_1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細胞、P-815細胞、H345細胞 HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞 APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞 BV173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞 HCT.116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞 細胞生長特性:貼壁 HBE135-E6E7 Cell:人支氣管上皮細胞系 細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺風機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風機的超凈臺,應使瓶口斜置,應盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復工作臺面。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞 Case 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2106細胞、BGC823細胞、H1666細胞 C-28I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPPVEC細胞、H-1650細胞、NCI-H1993細胞 ISHI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF17細胞、MC-26細胞、NCI-SNU-387細胞 SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞 HUT-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞 IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞 HBE135-E6E7 Cell:人支氣管上皮細胞系 P3-Jiyoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細胞、SHZ-88細胞、SK-RC-39細胞 SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞 BCaP 37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-1細胞、PC615.3細胞、AG06814-N細胞 SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞 GM 2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154B細胞、GI-1細胞、EFM-192A細胞 HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞 Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞 DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞 IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞 IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞 293/EBNA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞 Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞 H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞 NCIH2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細胞、H1954細胞、HS-766T細胞 LM2-4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Spodoptera frugiperda clone 9細胞、MHCC97細胞、T-98G細胞 SKOV-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞 8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞 VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞 NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞 Normal Rat Kidney-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細胞、MDA-MB157細胞、Wayne State University-Head and Neck 13細胞 H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞 786-0WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細胞、BXPC3細胞、TW 01細胞 NK92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC5細胞、PC-9/S1細胞、N1S1細胞 HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞 NCIH2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RTMC細胞、ssMCF-7細胞、CAL148細胞 H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞 Panc_05_04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞 QGY 7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細胞、HOPC細胞、MS1細胞 Emory University-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細胞、CHP100細胞、Capan-2細胞 IOSE-Van細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM Cub 1細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞、HMO6細胞 LS 513細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H292細胞、Molm14細胞、XuanWei Lung Cancer-05細胞 SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞 FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞 N2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、SNU16細胞 TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞 16-HBEo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat 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226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞 H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞 NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-735細胞、HuLEC-5a細胞、KAT5細胞 "
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