"A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；女性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代24h-48h處于對(duì)數(shù)期的細(xì)胞，在凍存前24h換液；按照常規(guī)方法消化，離心，收集細(xì)胞沉淀；用血清重懸細(xì)胞沉淀，用血球計(jì)數(shù)板或者細(xì)胞計(jì)數(shù)儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；配制細(xì)胞凍存液，將凍存液加到細(xì)胞液中，吹打混勻，控制細(xì)胞密度為2×10(6)-5×10(6)/ml；將細(xì)胞懸液按照1ml/支分裝至已標(biāo)記好的凍存管中，旋緊管蓋；將凍存管放入程序凍存盒中，凍存盒立即移至-80°C冰箱中，過(guò)夜后將凍存細(xì)胞移至液氮中長(zhǎng)期保存。凍存管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml/vial為宜。細(xì)胞凍存和復(fù)蘇遵循“慢凍快溶”的原則。取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿，否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管之爆裂。細(xì)胞凍存時(shí)細(xì)胞狀態(tài)不佳，會(huì)嚴(yán)重影響復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞的活率。一般選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存，凍存前一天細(xì)胞進(jìn)行換液；消化過(guò)度也會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞凍存后復(fù)蘇的活率；凍存細(xì)胞時(shí)為按照溫度梯度進(jìn)行操作，會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞活率。
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無(wú)菌意識(shí)要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面，并開(kāi)啟超凈工作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺(tái)，以７０%ethanol擦拭無(wú)菌操作抬面。無(wú)菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個(gè)人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無(wú)菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無(wú)菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開(kāi)之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開(kāi)后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對(duì)相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對(duì)細(xì)胞的影響。
SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAntle cell VERona-1細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞、J111細(xì)胞
HT1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細(xì)胞、RL-65細(xì)胞、NK62a細(xì)胞
MC57G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞、HT144細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
COLO 824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細(xì)胞、NP-69細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞
LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞
IOSE29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32r細(xì)胞、SCC7細(xì)胞、CORL26細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
動(dòng)物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹：１)CO２培養(yǎng)箱：CO２培養(yǎng)箱是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，它為細(xì)胞提供了一個(gè)體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境，如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O２濃度等。細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)很容易受到各種細(xì)菌、微生物的感染，因此，CO２培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要；２)烘箱(干燥箱)：用于細(xì)胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用，玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時(shí)，烘箱內(nèi)溫度一般要達(dá)到１６０℃以上，通常使用鼓風(fēng)式烘箱。其優(yōu)點(diǎn)是溫度均勻、效果較好，缺點(diǎn)是升溫過(guò)程較慢。升溫時(shí)不能先升溫后鼓風(fēng)而應(yīng)鼓風(fēng)與升溫同時(shí)開(kāi)始，至１００℃時(shí)，停止鼓風(fēng)。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦，燒焦的碎屑可影響細(xì)胞的生長(zhǎng)。消毒后不能立即打開(kāi)箱門(mén)，以免驟冷導(dǎo)致玻璃器皿破裂，應(yīng)等溫度自然下降至１００℃以下后可開(kāi)門(mén)。３)超凈工作臺(tái)/生物安全柜：細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)無(wú)菌環(huán)境要求很高，在細(xì)胞操作時(shí)，一般需要在１００級(jí)空氣質(zhì)量條件下進(jìn)行，因此超凈工作臺(tái)或生物安全柜就必須配備。４)液氮罐：為了保存細(xì)胞，特別是不易獲得的突變型細(xì)胞或細(xì)胞株，要將細(xì)胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-１９６℃，因此，需要液氮罐。在此環(huán)境中，一般細(xì)胞可以保存十年具有活性。５)超低溫冰箱：細(xì)胞的凍存過(guò)程需要一系列程序降溫，一般４℃下存放３０min，轉(zhuǎn)放-２０℃ １ hour，再轉(zhuǎn)入-７０至-８０℃過(guò)夜，之后才可以轉(zhuǎn)移到液氮內(nèi)(-１９６℃)，這時(shí)就必須配備一臺(tái)-８６℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細(xì)胞可達(dá)數(shù)月，對(duì)于不需要長(zhǎng)期凍存的細(xì)胞，可暫時(shí)放于超低溫冰箱保存。６)恒溫水?。簭囊旱虺蜏乇渲腥〕黾?xì)胞凍存管需要立即放于３７℃水浴中快速?gòu)?fù)蘇之后才傳代培養(yǎng)，因此，恒溫水浴也是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室必備儀器。７離心機(jī)：細(xì)胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細(xì)胞，所以需要配置低速的常溫離心機(jī)，對(duì)于后期細(xì)胞內(nèi)容物的分離則需要高速冷凍離心機(jī)。除上述儀器外，移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細(xì)胞培養(yǎng)的必備儀器，發(fā)酵罐、轉(zhuǎn)瓶機(jī)等也常常見(jiàn)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室。
Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞、U-266 AR1細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細(xì)胞、He La細(xì)胞、TE14細(xì)胞
Mel RM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFC細(xì)胞、HEK-293-F細(xì)胞、H2135細(xì)胞
159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2122細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞、CCD-1112sk細(xì)胞
FOXNY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F1細(xì)胞、P815細(xì)胞、251 MG細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
D324細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR32細(xì)胞、NCI-H211細(xì)胞、RMC-1細(xì)胞
CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
IPLB-Sf21-AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU1細(xì)胞、H-1648細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
TE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF#1細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞
COV504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細(xì)胞、Rh30細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞
HUT-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞
HUT-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC23細(xì)胞、COLO-699細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞
HTori:3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7/Hap8細(xì)胞、H4-II-E細(xì)胞、SCC7細(xì)胞
HPAFII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-1細(xì)胞、SKG-3a細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞
PC-3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞
HCT 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細(xì)胞、MOLT-16細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
IEC-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH7777細(xì)胞、CTV1細(xì)胞、Kit 225細(xì)胞
Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞
1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞
SUM 149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Detroit-562細(xì)胞、CHL1細(xì)胞、HT(H9)細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G-Olig2細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞
UM-UC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF-1 MEF細(xì)胞、GL261細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
LSECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞、DHL10細(xì)胞
PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞
H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞
H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBdSMC細(xì)胞、IM95細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞
FCCH1018細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細(xì)胞、210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、EFM-192C細(xì)胞
HCC-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMECs細(xì)胞、P3-X63Ag8細(xì)胞、EST50細(xì)胞
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞
5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
SU.86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D6P2T細(xì)胞、U031細(xì)胞、IMR90細(xì)胞
SF-767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞
UCLA-SO-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H650細(xì)胞、HDSMC細(xì)胞、H-711細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
HOP-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細(xì)胞、SCC25細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞
OCI-Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG7701細(xì)胞、HOP62細(xì)胞、THPI細(xì)胞
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞
CAL-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 678細(xì)胞、WM451細(xì)胞、hTERT-HPNE細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
A375-SM Adherent人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
VMCUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5.1細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞、NOR10細(xì)胞
Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
BHK-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞
CV-1 in Origin Simian-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1993細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞、TF-1a細(xì)胞
MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞
HT-1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T6細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞
NCI-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SR細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
"